D101树脂法分离银杏黄酮类物质的研究

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银杏在我国中药应用中有悠久的历史,它的药用范围十分广泛,其主要的疗效活性成分为银杏黄酮类和内酯类。研究表明黄酮类、内酯类主要有清除氧自由基,帮助延缓衰老、抗炎镇痛、抑菌抗病毒、舒张冠状血管等药理作用。因此,如何更好地从银杏叶中提取和分离这类活性成分成为近年来研究的热点。 本文研究了银杏黄酮的水—乙醇提取工艺,就不同的提取条件进行工艺优化。通过正交试验得出影响提取效率的显著性因素为料液比、乙醇浓度、提取温度,由单因素试验得到较佳工艺条件:料液比1∶10,乙醇浓度70%,提取温度70℃,粒度40~80目,回流提取时间为2h。本文研究了银杏叶提取液的分析方法:在分析银杏叶提取液中总黄酮含量时,加入只与黄酮类物质有特征反应的硝酸铝,采用分光光度法测定银杏叶提取液中总黄酮含量,检测波长为415nm。在6.32×10-4-0.476mg/ml的浓度范围内,黄酮含量(C)与吸光度(A)呈良好的线形关系,该方法简单快速、准确。 本文研究采用了D101大孔吸附树脂分离纯化银杏叶中提取黄酮,分别采用了静态吸附和动态吸附的方法考察D101大孔吸附树脂吸附银杏黄酮的特性。用静态法测定了在10℃、25℃、40℃时不同温度下的吸附等温线。结果发现,在所研究的温度范围内,银杏黄酮的吸附量随着温度的升高而增加,从10℃变化到25℃时,吸附量增加较多,但在温度从25℃变化到40℃吸附量增加较少。结果可知银杏黄酮在树脂上的吸附过程为吸热过程,适当的温度升高有利于吸附,但是温度范围不同升温影响的效果是不同的。 动态法测定银杏黄酮的吸附流出曲线,建立了相应的模型,根据实验数据进行拟合,发现和模型方程能很好吻合,回归方程相关系数均在0.98以上。通过流出曲线的分析可知,低流速,高初始浓度,适当的操作温度和适当的高径比使吸附状况得到改善。得出较佳条件为:料液初始浓度为0.780mg/ml,流速3ml/min,树脂柱(高,径)为12×3cm,操作温度25℃,穿透曲线模型方程为C/0.780=1-exp[-((t-6.5)/(28.9))1.4261]。 对解吸过程的研究发现,不同浓度的洗脱液和洗脱流速对解吸率有很大的影响,对于解吸过程不能只考虑解吸率的大小,而是综合考虑产品的处理过程。得到洗脱过程较佳操作条件为乙醇浓度为70%,洗脱速度为1.5mL/min,温度为室温。
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