褪黑素刺激对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖和分化的影响及机理研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:esshuc
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本研究旨在探讨褪黑素及其受体阻断后对内蒙古绒山羊毛囊干细胞增殖和分化过程中整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1/10十一个基因表达的研究,为内蒙古白绒山羊毛囊干细胞定向增殖及其诱导分化提供相关的理论基础。1.探寻研究褪黑素对毛囊干细胞的最适增殖分化浓度,采用0pg/mL (CG)、 100pg/mL、300pg/mL、500pg/mL、700pg/mL五个浓度梯度对毛囊干细胞连续处理21d,分别提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的细胞eDNA为模板采用实时定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAPT、KAPS、K5/14和K1/10十一个基因表达量。结果显示,500pg/mL浓度的褪黑素为毛囊干细胞定向分化为毛囊细胞的最适分化浓度,300pg/mL浓度的褪黑素为毛囊干细胞定向分化为表皮细胞的最适分化浓度,且同时存在整合素β1、SOX9、β-catenin, BMP2/4、KAPT、KAP8、K5/14和K1/10在一定的时间点出现高表达的现象。2。探寻研究褪黑素对毛囊干细胞分化为毛囊细胞膜受体作用,根据第一个实验确定的最适分化浓度,设立Opg/ml、500pg/mL、500pg/mL+4-P-ADOT(MT2阻断剂)、500pg/mL+Luzindole (MT1+MT2阻断剂)四个实验组处理毛囊干细胞,分别提取0d、1d、3d、5d、7d、14d和21d的细胞cDNA为模板采用实时定量PCR方法整合素β1、SOX9、β-catenin、BMP2/4、KAP7、KAP8、K5/14和K1/10十一个基因表达量。结果显示,加入阻断剂组未出现KAP7、KAP8高表达现象,褪黑素作用毛囊干细胞向毛囊细胞分化是通过细胞膜上的受体2调节实现的。
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