检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot-PPA-ELISA方法的建立

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liwanlin
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本研究以沙门氏菌的改良H.E.抗原为膜载抗原,建立了检测仔猪副伤寒血清抗体的Dot-PPA-ELISA方法。研究中对多种方法提取的沙门氏菌抗原进行了筛选,选取了特异性良好的抗原;确定了Dot-PPA-ELISA的最佳工作条件;初步确定了感染仔猪副伤寒的Dot-ELISA抗体阳性标准为1:32,猪只抵御副伤寒感染的Dot-ELISA抗体保护标准为1:512。本研究制备的诊断膜片特异性强:不与猪衣原体病、猪口蹄疫病、猪大肠杆菌病、猪布氏杆菌病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、猪巴氏杆菌病、猪链球菌病的阳性血清发生交叉反应;诊断膜片具有良好的敏感性,能够检测到1:2048稀释的动物试验阳性血清;膜片的保存期长,在10~25℃可保存4个月、4℃条件下至少可保存6个月其灵敏度不变。该方法操作简便快捷、结果客观、易于判定、各种试剂材料均可做到标准化、重复性好,适合规模化养猪场仔猪副伤寒的抗体监测以及流行病学调查之用。
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