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目的近年来人们认识到肿瘤微环境与肿瘤细胞相互作用促进肿瘤的侵袭进展。恶性肿瘤微环境中含有大量的肿瘤相关性巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)以及具有生物活性的细胞因子,如集落刺激因子-1(colony-stimulating factor-1,CSF-1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)及一系列趋化因子等。本研究主要探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)间质中浸润的巨噬细胞与肿瘤源性CSF-1、IL-6之间的关系以及影响患者预后的因素;并进一步分析三个指标在肺腺癌侵袭进展的预后价值,并初步研究其可能的作用机制。方法1.采用免疫组化方法检测组织芯片417例NSCLC患者的CSF-1、IL-6表达和CD68标记的TAMs浸润情况,并结合临床病理因素及预后情况进行分析。2.免疫组化检测312例肺腺癌组织(包括37例原位腺癌/微浸润腺癌AIS/MIA、127例伏壁样生长为主型腺癌LPA、148例其它类型)CD68标记的TAMs、CSF-1以及IL-6的表达情况。免疫组化检测278例肺腺癌组织E-cadherin、Snail及MMP-2的表达情况,并应用免疫荧光双染技术分析间质中E-cadherin与TAMs的关系。3.蛋白免疫印记(Western blot)方法初步检测10例配对的肺腺癌及癌旁组织CSF-1表达情况,进一步应用免疫组化法检测266例肺腺癌患者组织芯片中CSF-1、表皮生长因子受体(EGFR)和CD68标记的TAMs的表达水平,并分析其预后。结果1.417例NSCLC中,CSF-1、IL-6表达水平分别与间质中CD68标记的TAMs浸润程度正相关(r=0.184,r=0.196;P<0.001)。单因素Kaplan-Meier生存分析显示:CSF-1、IL-6的表达情况与患者生存时间均有统计学意义(P<0.001),而TAMs浸润与否无显著性差异(P>0.05)。而CSF-1和/或IL-6与CD68联合分析,其结果变得有统计学意义(P<0.001)。Cox多因素分析表明CSF-1/IL-6/CD68三者联合的表达情况为独立预后因素(P<0.05),而两两联合并不是独立预后因素(P>0.05)。2.312例肺腺癌中,TAMs间质中高度浸润者预后差(P<0.05)。与AIS/MIA相比,间质中TAMs在LPA组织的浸润程度更高(P<0.05)。生存分析表明CSF-1/IL-6/CD68三者联合的表达情况为肺腺癌患者独立预后因素(P<0.001)。分层分析显示,在AIS/MIA患者亚组中,间质中TAMs浸润程度与患者5年生存时间有统计学意义(P<0.05);而在高度浸润的TAMs亚组中,AIS/MIA与LPA患者的生存时间无显著性统计学差异(P>0.05)。进一步分析,CD68+CSF-1+IL-6+组与其它组(CD68-,CD68+CSF-1+IL-6-,CD68+CSF-1-IL-6+,CD68+CSF-1-IL-6-)患者的5年生存时间有显著性统计学差异(P<0.05);而在CD68/CSF-1/IL-6三者均阳性的亚组中,AIS/MIA与LPA患者5年生存时间无显著性统计学差异(P>0.05)。相关分析表明E-cadherin,Snail,MMP-2表达分别与TAMs浸润程度显著相关(P<0.05)。3.Western blot法检测到5例肺腺癌组织CSF-1蛋白表达水平明显高于癌旁。单因素分析显示,TNM分期、淋巴结阳性数目、淋巴结阳性站数、CSF-1表达、CSF-1联合EGFR表达及CSF-1、CD68和EGFR联合表达与肺腺癌患者的5年生存率有关(均P<0.05)。多因素分析表明,TNM分期、CSF-1联合EGFR表达及CSF-1、CD68和EGFR联合表达为影响肺腺癌患者预后的独立因素(均P<0.05)。相关性分析表明:CSF-1、EGFR表达分别与TAMs浸润情况呈正相关(P<0.05)。结论1.CSF-1、IL-6与TAMs表达的联合分析可作为NSCLC患者独立的预后指标。癌细胞分泌的CSF-1、IL-6募集巨噬细胞进入肿瘤微环境,并可能诱导TAMs向促肿瘤进展方向分化。2.间质中TAMs可能在AIS/MIA进展为LPA的过程中起到重要的作用,其机制可能涉及上皮间质转化和胞外基质降解。3.CSF-1和EGFR联合表达可作为肺腺癌患者术后独立的预测预后指标,其机制可能涉及癌细胞与TAMs的相互作用。