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分别对新城疫病毒Lasota株、H5亚型禽流感病毒N28株和H9亚型禽流感病毒SD696株的毒力、增殖特性、免疫特性和特异性等生物学特性进行了研究。新城疫La Sota株对鸡脑内致病指数为0.31、对鸡胚的最小致死量的平均死亡时间为110.4小时、对10日龄鸡胚的致死率为8／10、红细胞凝集价为1∶1024、病毒含量为108.5EID50／0.1ml、接种2—7日龄SPF雏鸡安全、能够特异性被新城疫阳性血清中和；H5亚型禽流感病毒N28株静脉致病指数为0.98、对10日龄鸡胚的致死率为1／10、接种4—5周龄SPF鸡分离阳性率10／10、红细胞凝集价为1∶512、病毒含量为107.2EID50／0.2ml、免疫原性良好、能够被H5亚型禽流感病毒阳性血清中和；禽H9亚型流感病毒SD696株静脉致病指为0.91、对10日龄SPF鸡胚的致死率为4／10、接种4—5周龄SPF鸡分离阳性率10／10、红细胞凝集价为1∶1024、病毒含量为107.5EID50／0.2ml、免疫原性良好、能够被H9亚型禽流感病毒阳性血清中和。采用新城疫病毒La Sota株、H5亚型禽流感病毒N28株和H9亚型禽流感病毒SD696株分别接种接种10日龄非免疫鸡胚，得到病毒含量分别是108.5EID50／0.1ml、107.17EID50／0.2ml和108.17EID50／0.2ml的三种病毒液。以上病毒液均采用最终浓度为0.2％的甲醛溶液灭活后，通过采用切向流30万级超滤膜浓缩3—4倍后，三种病毒液HA分别达到1∶1024、1∶512和1∶1024。浓缩后病毒液按照最终含量分别为9.6％、10.8％和10.8％的比例制成3批油乳剂灭活疫苗。经过物理性状检验，疫苗均为乳白色油包水剂型；取疫苗样品10ml装于离心管中，以3000r／min离心15分钟，3批疫苗样品均不分层；用1ml吸管（上口内径2.7mm，下口内径1.2mm），吸取25℃左右的疫苗样品1ml，让其垂直自然流出，记录流出0.4ml所需的时间，3批疫苗样品流出时间均在8秒以内。试制的疫苗通过颈部皮下或胸部肌肉分别注射4-5周龄SPF鸡10只，每只疫苗2.0ml，观察14日，全部存活，且未出现因疫苗引起的局部和全身不良反应。试制的疫苗通过颈部皮下或胸部肌肉分别注射免疫4-5周龄SPF鸡15只，接种21日后采血，分离血清。免疫鸡新城疫、禽流感H5和H9亚型HI抗体效价均高于1∶64，对照鸡血清HI抗体检测为阴性；免疫鸡用105ELD50新城疫强毒北京株肌肉注射攻毒，观察14日，10／10保护，对照组全部死亡；免疫鸡用2×106EID50禽流感SD696株病毒液静脉注射攻毒，攻毒后病毒分离10／10阴性，对照鸡病毒分离阳性率为9／10。试制疫苗的免疫持续期试验和疫苗保存期实验表明，疫苗免疫持续期在20周以上，疫苗保存期达到12个月以上。试验结果表明，研制的疫苗各项指标均达到新城疫灭活疫苗、H9亚型禽流感灭活疫苗或H5亚型禽流感灭活疫苗的有关质量标准，完全可以用于新城疫、H9亚型禽流感和H5亚型禽流感的防疫。