本论文为了研究斗米虫蛋白的体外抗肿瘤活性及其免疫调节作用。提取斗米虫总蛋白,逐级盐析分为3个部分,透析除盐后得到不同蛋白部位,并采用SDS-PAGE检测斗米虫不同蛋白部位的分子量;利用MTT法、流式细胞术等方法研究斗米虫蛋白对人胃癌细胞MFC和小鼠乳腺癌细胞4T1增殖、迁移和凋亡的作用。MTT法研究斗米虫蛋白对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖的影响,荧光微球吞噬实验检测斗米虫蛋白对RAW264.7细胞吞噬能力的影响;Griess法检测对RAW264.7细胞释放NO能力的影响;ELISA法检测对RAW264.7细胞的IL-6、TNF-α和IL-1β分泌量;qRT-PCR法检测不同浓度的斗米虫蛋白作用后RAW264.7细胞中TNF-α、IL-1、TLR4、MIR-7、IFN-γ、IL-6 以及 4T1 细胞中 MMP2、MMP9、STAT3,c-Myc 和 Sdf1 mRNA水平变化。Western Blot法来检测斗米虫蛋白作用于RAW264.7细胞后蛋白表达量的变化。实验结果证明,斗米虫蛋白主要分子量集中63kDa,斗米虫蛋白对人胃癌细胞MFC及小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖表现出较好抑制作用,对于MFC的细胞增殖抑制率最高可达到83%,4T1细胞增值抑制率达到53%,并呈现出一定剂量依赖关系(P<0.05),对RAW264.7细胞表现出较好的促进增殖的作用(P<0.05)。斗米虫蛋白实验组与正常组细胞相比可以抑制4T1细胞的迁移,可诱导MFC和4T1细胞凋亡;斗米虫蛋白能够提高RAW264.7细胞的吞噬活性、NO释放量、TNF-α、1L-1β和IL-6分泌量及TNF-α、IL-1、TLR4、MIR-7、IFN-γ和IL-6细胞因子的mRNA水平以及能显著下调 4T1 细胞中 MMP2、MMP9、STAT3、c-Myc 和 Sdf1 mRNA 水平(P<0.05,P<0.01)。斗米虫蛋白均能明显增加RAW264.7细胞MyD88和TRIF蛋白的表达量。由此推论,斗米虫蛋白具有较好的体外抗肿瘤活性并且具有潜在的免疫调节作用。