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目的:分析P16、Ki-67在宫颈病变中的表达情况;探索P16和Ki-67在阴道镜Ⅲ型宫颈转化区中的表达情况;探究P16和Ki-67与HPV分型、TCT的联系;综合评估P16、Ki-67、HPV分型及TCT检查在HSIL+中诊断效能,进而为宫颈病变的分层诊治提供参考。方法:回顾性收集2021年1月-2022年12月在南昌大学第一附属医院因SIL就诊并手术,且有完整临床资料的169例患者信息,以组织学病理诊断为“金标准”。根据术后组织学病理将研究对象分为:LSIL-组（63例）、HSIL+组（106例）两组。收集临床资料包括:年龄、绝经与否、HPV分型、TCT结果、阴道镜宫颈转化区类型、活检病理、术后病理及P16、Ki-67表达情况。分析P16、Ki-67在宫颈病变中的表达情况;分析P16和Ki-67在TCT、HPV和阴道镜Ⅲ型宫颈转化区术后病理的表达情况;计算HPV、TCT、P16、Ki-67单一和联合检测对诊断HSIL+的敏感度、特异性、阳性预测值及阴性预测值,并绘制ROC曲线。结果:1、169例研究对象一般资料:绝经者40例,未绝经者129例。平均年龄42.74±12.06岁,年龄19-81岁之间。HPV16/18阳性81例,其他高危型阳性83例,HPV阴性5例。其TCT结果中NILM 64例,ASC-US 47例,ASC-H 19例,LSIL 21例,HSIL 18例。阴道镜宫颈转化区Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型分别32/76/61例。2、P16在LSIL-组、HSIL+组中的阳性率分别为44.44%和92.45%（P＜0.05）。P16的阳性率随宫颈病变级别的升高呈上升趋势,P16的阳性率与宫颈病变程度呈正相关（r=0.521,P＜0.05）。Ki-67在LSIL-组、HSIL+组中的阳性率分别为84.13%和96.23%（P＜0.05）。Ki-67的阳性率随宫颈病变级别的升高呈上升趋势,Ki-67的阳性率与宫颈病变程度呈正相关（r=0.312,P＜0.05）。3、LSIL-组中HPV16/18型阳性32例,其他高危型HPV阳性28例,HPV阴性3例;HSIL+组中HPV16/18型阳性49例,其他高危型HPV阳性55例,HPV阴性2例。组间差异无统计学意义（P＞0.05）。4、阴道镜Ⅰ型宫颈转化区的研究对象中位数年龄约为33岁;Ⅱ型宫颈转化区中位数年龄约为38岁;Ⅲ型宫颈转化区中位数年龄约为51岁（P＜0.05）。不同阴道镜宫颈转化区与年龄有相关性（r=0.510,P＜0.001）。不同阴道镜宫颈转化区与绝经情况有相关性（r=0.412,P＜0.001）。5、阴道镜Ⅰ型宫颈转化区的术后病理升级率为3.13%,Ⅱ型宫颈转化区的术后病理升级率为10.53%,Ⅲ型宫颈转化区的术后病理升级率最高,为22.95%（P＜0.05）。在阴道镜Ⅲ型宫颈转化区中,P16在术后病理为LSIL-中阳性率为19.05%,在HSIL+中阳性率90.00%;P16阳性40例中,4例（10.00%）术后病理为LSIL-,36例（90.00%）为HSIL+;P16阴性21例中,17例（80.95%）术后病理为LSIL-,4例（19.05%）为HSIL+（P＜0.05）。Ki-67在术后病理为LSIL-中阳性率为66.67%,在HSIL+中阳性率97.50%;Ki-67阳性53例中,14例（26.42%）术后病理为LSIL-,39例（73.58%）为HSIL+;Ki-67阴性8例中,7例（87.50%）术后病理为LSIL-,1例（12.50%）为HSIL+（P＜0.05）。6、P16在HPV16/18型阳性中阳性率为69.14%,在其他高危型HPV阳性中阳性率为79.52%,在HPV阴性中阳性率为76.11%（P＞0.05）。Ki-67在HPV16/18型阳性中阳性率最高（96.30%）,其次为其他高危型HPV阳性（87.95%）,在HPV阴性中阳性率最低（80.00%）（P＜0.05）。7、TCT为ASC-US/ASC-H/LSIL的研究对象中,P16在活检病理为LSIL-中阳性率为38.24%,在HSIL+中阳性率为96.23%;P16表达阳性64例,其中51例（79.69%）活检病理为HSIL+,13例（20.31%）为LSIL-;P16表达阴性23例,其中2例（8.70%）活检病理为HSIL+,21例（91.30%）为LSIL-（P＜0.05）。Ki-67在活检病理为LSIL-中阳性率为85.29%,在HSIL+中阳性率96.23%;Ki-67表达阳性80例,其中51例（63.75%）活检病理为HSIL+,29例（36.25%）为LSIL-;Ki-67表达阴性7例,其中2例（28.57%）活检病理为HSIL+,5例（71.43%）为LSIL-（P＜0.05）。8、诊断HSIL+的效能:在单一检测时,P16诊断效能最高（AUC=0.740）,HPV诊断效能最低（AUC=0.514）;联合检测时HPV+P16诊断效能最高（AUC=0.746）;其次为HPV+P16+Ki-67（AUC=0.736）,HPV+Ki-67的检测效能最低（AUC=0.567）。结论:1、P16、Ki-67的表达与宫颈病变分级呈正相关,P16及Ki-67的阳性率随宫颈病变级别的升高呈上升趋势。2、在阴道镜Ⅲ型宫颈转化区中,P16及Ki-67可对诊断HSIL及以上病变有指导意义。3、结合P16、Ki-67和HPV分型结果,可指导宫颈病变的分层诊治。