降香黄檀黑痣病分子诊断、发生规律及无公害防治研究

来源 :中南林业科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanxiaoxi
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降香黄檀是海南省热带珍贵乡土树种之一,随着降香黄檀人工林栽培面积不断增加,病虫害问题日益突出。我们课题组经调查发现降香黄檀黑痣病是降香黄檀苗期和幼树期的主要病害,该病害在寄主表面形成黑色凸起的盾片,严重时盾片覆满整个寄主叶片表面,严重影响植物的光合作用,致使植物提前落叶。降香黄檀黑痣病原菌寄生性强、传播途径复杂,且黑痣属真菌是一类专性寄生的活体营养真菌,即不能通过传统的组织分离方法来培养该病原菌,采用常规的病害诊断技术难以准确、快速地鉴定该病原菌。为此,本论文构建出降香黄檀黑痣病菌的快速分子检测体系,研究了降香黄檀黑痣病在林间的发生规律,并开展了无公害防治试验。主要的研究结果如下:(1)降香黄檀黑痣病菌快速分子检测体系。本研究设计出针对黄檀黑痣菌的特异性引物P1/P2,结合真菌通用引物ITS4/ITS5构建巢式PCR,能够检测到100ag的黄檀黑痣菌基因组DNA,与常规PCR相比,检测灵敏度提高了 104倍。采用该巢式PCR技术可以将未显症降香黄檀叶片中的黄檀黑痣菌灵敏、快速的诊断出来。(2)降香黄檀黑痣病林间发生规律。研究结果表明,3月中下旬为该病害的始发期,降香黄檀发出大量嫩叶,林间开始有零星病株出现,患病初期,叶片上出现淡黄色斑点,逐渐在黄斑中出现一个或多个圆形的小黑点,以后小黑点随着黄斑的扩大,成为不断增大、隆起的黑痣;6~9月上旬,病情加重,林间62%以上降香黄檀均受该病害侵染,病情指数急剧上升,在26.1~45.5之间,为该病害的盛发期;到了 11月上旬病害严重程度达到高峰,此时该病害的发病率高达83%,大量降香黄檀叶片上覆满了凸起的黑痣,严重影响了整株的光合作用,导致叶片干枯。11月中旬~翌年3月,由于温度湿度的降低,以及落叶现象,病情趋于平缓。(3)降香黄檀黑痣病无公害防治。降香黄檀+檀香、降香黄檀+大果紫檀这两种不同的种植模式下,降香黄檀黑痣病的始发时间均是3月下旬,但两者的病情指数分别为3.1和6.5,在发病后期,两者的病情指数差异不断增大,分别为21.6和51.8,说明降香黄檀+檀香混交对降香黄檀黑痣病能够起到很好的预防作用。选用70%甲基托布津、50%多菌灵、3%中生菌素、80%代森锰锌、50%嘧菌酯、60%百泰、75%百菌清这7种杀菌剂对降香黄檀黑痣病进行林间防效试验,单一施药的林间防效依次为:60%百泰>50%嘧菌酯>80%代森锰锌>50%多菌灵>75%百菌清>70%甲基托布津>3%中生菌素。对筛选出的3种林间防效较好的药剂进行连续单一和轮换用药两种方式研究,连续4次用药后防治效果依次为:轮换用药(72.27%)>60%百泰(37.16%)>50%嘧菌酯(34.11%)>80%代森锰锌(32.12%)。单一用药在第三次施药时防治效果均有不同程度的降低。但3种药剂轮换施用后,发病率依次为73.45%、53.25%、45.32%、34.24%,病情指数依次为 36.47、32.27、24.95、20.32,防治效果依次为 44.48%、55.31%、66.68%、72.27%,因此,轮换用药能有效的防治降香黄檀黑痣病。考虑选用高效低毒、低残留且市场价格合适的杀菌剂,最终筛选出的施药方式是百泰、嘧菌酯、代森锰锌轮换用药,每15d施药一次,使用喷雾机进行施药,施药时间为早上8:00~10:00或下午15:00~17:00,如遇暴雨天气可延迟用药。
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