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背景:高血压是常见的慢性病,也是心脑血管疾病主要的危险因素之一,已然成为严重威胁人类健康,带来沉重经济负担的全球性公共卫生问题。我国高血压患者血压控制现状不容乐观,在现有药物治疗策略下,探索新的有效控制血压的方法是很有必要的。交感神经系统的过度激活在高血压的发生和发展中起着至关重要的作用。阻断肾脏传入感觉神经能够降低中枢到外周的交感活性,破坏传出交感神经能影响肾脏对水钠的重吸收等,这些都是有利于治疗高血压的。过去十年中,经导管肾去交感神经术(RDN)秉持这一理念,通过射频消融的能量破坏附着于血管外膜的肾脏神经治疗高血压。虽然在早期的研究中RDN的降压效果存在争议,但近年来SPYRAL HTN-OFF MED、SPYRAL HTN-ON MED以及RADIANCE HTN-SOLO、RADIOSOUND-HTN等多项严格设计的研究均证实RDN有确切且持久的降压效果。但是在这些研究中,即使已经消融了大量的位点(例如SPYRAL OFF-Med研究中,每个患者平均消融43.8个点),但诊室收缩压降仅下降约为10mmHg。此外,仍然有超过20%的患者血压无改善或者血压不降反升。如何对RDN技术进行优化,提高降压效能以及减少无应答患者比例是亟待解决的问题。肾神经刺激(RNS)可以诱发即刻的血压上升反应,而这种反应在给予RDN后(即神经破坏后)会被显著的抑制甚至消失。这一现象预示着RNS可判断该点神经的生理功能情况,可用于评估消融后神经是否已经被破坏。与此同时,肾动脉上不同的位点在RNS过程中血压上升幅度也不尽相同。因此,RNS为RDN术中标测神经分布提供了一种可能。此外,在我们前期研究以及少量的文献报道中发现,尚有部分位点刺激时表现出血压下降反应。目的:探索RNS引起的血压改变与该点的自主神经分布的关系。为RNS能够反映该点的神经分布特点,指导RDN中消融位点的选择,提高RDN的降压效能提供理论基础和实验证据。方法:实验分为两个部分:第一个部分:将纳入的昆明犬随机分配到刺激强反应消融组(strong response ablation group,SRA),刺激弱反应消融组(weak response ablation group,WRA)以及刺激对照组(renal nerve stimulation control group,RSC),比较有创股动脉血压的改变,并用ELISA法测定术前以及4周随访时的股静脉血浆NE水平,高效液相色谱法检测肾组织局部NE,Western Blot法检测肾组织TH表达,Masson染色确定消融区域,通过软件测量神经的面积、数量以及距离管腔的距离。第二个部分:首先设立梯度的小功率短时间的消融能量,筛选适宜的用于标记的消融参数(low energy radiofrequency ablation,LERA:指不破坏神经,但能损伤动脉壁的消融能量)。随后将可用的肾动脉随机分配到上升反应(ER)组,下降反应(RR)组和无反应(NR)组,接受LERA。肾动脉的切片使用Masson染色确定消融区域,通过神经源性一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)标记副交感神经纤维,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)标记传出交感神经纤维,降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)标记传入感觉神经纤维,进行神经类型及面积的定量分析。结果:第一部分:对SRS消融较WRS消融可以获得更大的血压下降幅度(P=0.002),更低的肾组织NE、TH表达以及更显著的血浆NE下降(肾组织TH:P=0.004;血浆及肾组织NE:P=0.002)。此外,SRS的神经密度高于WRS(神经面积:P=0.012;神经数量:P<0.001)。消融前刺激过程的血压升高幅度、刺激时候血压升高效应被抑制的程度(指消融前后刺激反应的差值)、血浆NE的降低幅度、肾皮质NE含量均与4周后SBP降低幅度具有显著的相关性(分别为:R=0.649,P=0.012;R=0.643,P=0.013;R=0.837,P<0.001;R=0.927,P<0.001)。第二部分:3 Watts,20s以及3 Watts,30s能较成功地引起血管壁纤维化改变,且破坏未穿透血管壁。三种反应位点的传出交感神经的比例无统计学差异(P=0.251)。ERS的感觉传入神经比例较RRS和NRS高(P=0.012和P=0.004),RRS与NRS的感觉传入神经比例无统计学差异(P=0.798)。RRS的副交感神经分布的比例最高(RRS vs.ERS,P=0.017;RRS vs.NRS,P=0.023),ERS与NRS的副交感神经分布比例未发现统计学差异(P=0.723)。结论:本研究的主要结论:1.消融刺激强反应位点较弱反应点可以获得更好的降压效果;2.消融刺激强反应位点较弱反应点血浆NE的降低幅度更大,肾组织局部NE、TH的表达更低;3.刺激强反应位点较弱反应点有更丰富的神经分布;4.刺激血压上升的位点感觉传入神经纤维分布的比例较高,而刺激血压下降的位点副交感神经的比例更高。总之,RNS可以一定程度上反映肾动脉自主神经的分布特点,指导RDN在交感神经丰富的位点消融,提高RDN的降压效能。