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第一部分卵母细胞透明带发育不良的相关临床因素分析 目的: 分析卵母细胞透明带发育不良的相关临床因素。 方法: 回顾性分析2015年10月至2016年7月于北京大学深圳医院生殖医学科行IVF治疗的患者共569个周期的临床资料,按是否出现透明带发育不良分为两组:出现卵母细胞透明带发育不良为A组,217个周期;卵母细胞正常为B组,352个周期,比较两组基本资料。再按年龄和卵巢功能分组来比较促排卵、获卵与受精情况,分析临床结局。用两样本t检验、卡方检验对数据进行统计学分析。P<0.05为差异具有统计学意义。 结果: A组与B组相比,年龄[(35.4±5.6)岁 vs.(34.4±5.9)岁]、基础FSH[(9.37±5.37)U/L vs.(8.52±4.00)U/L]、AMH[(3.76±5.7)ng/ml vs.(4.68±4.12)ng/ml]的差异均有统计学意义(P<0.05),而年龄的OR值为1.036,95%CI(1.004-1.070)(P<0.05)。再按年龄及卵巢储备功能分组后,35≤&<40岁卵巢储备良好组,A组与B组相比,Gn天数[(11.7±2.8)天 vs.(10.3±3.4)天],Gn用量[(44.76±16.90)U/L vs.(34.22±17.44)U/L],MII卵数[(6.0±4.1)个vs.(9.0±6.1)个];≥40岁卵巢储备良好组, A组与B组相比,Gn天数[(11.4±3.9)天vs.(9.4±3.4)天],Gn用量[(49.24±27.51)U/L vs.(33.96±18.08)U/L],MII卵数[(3.9±2.3)个vs.(5.6±4.7)个],优质胚胎率(19.15%vs.40.88%)的差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论: 年龄是影响卵母细胞透明带发育的独立暴露危险因素,随着年龄增大(≥35岁时),当患者卵巢储备良好时,Gn用量越多、时间越长,越容易引起透明带发育不良;且透明带发育不良的出现导致该组成熟卵数显著下降,影响促排卵效率;而当年龄≥40岁卵巢储备良好时,透明带发育不良组还会出现优质胚胎率下降。 第二部分颗粒细胞透明带蛋白的表达与卵母细胞质量的关系 目的: 探究卵冠丘颗粒细胞透明带蛋白ZP1、ZP2、ZP3与患者自身条件、卵母细胞成熟度及其后续受精与发育潜力的关系。 方法: 纳入2016年11月至2017年3月于北京大学深圳医院生殖医学科行卵母细胞浆单精子注射(ICSI)助孕治疗的患者,取正常卵母细胞的卵冠丘颗粒细胞,以q-PCR的方法检测颗粒细胞中透明带蛋白ZP1、ZP2、ZP3的表达,同时收集患者的一般情况与其获卵及受精情况。以两种方式进行分组,①按年龄把患者分为三组:<30岁组、30≤&<35岁组、≥35岁组;②按促排卵方案把患者分为三组:常规长方案组、拮抗剂方案组、微刺激方案组,用单因素方差分析比较各组ZP1、ZP2、ZP3的表达差异。取消分组后,用单因素或多因素线性相关分析各指标之间的相关关系,P<0.05认为有统计学意义。 结果: 卵冠丘颗粒细胞ZP1、ZP2、ZP3的表达与患者的年龄、促排卵方案均无相关性,而ZP3与患者卵巢储备(AMH)呈线性正相关关系:ZP3=-0.025+0.023×AMH,患者的获卵数与年龄、AMH、ZP3均有线性相关关系:获卵数=23.453-0.522×年龄+0.854×AMH+12.055×ZP3;ZP3作为影响卵母细胞成熟度的重要因子,与MII卵数也呈线性正相关关系:MII卵数=8.584+24.710×ZP3;同时,ZP3作为初级精子受体,与2PN受精数亦呈线性正相关关系:2PN受精数=5.007+24.710×ZP3;ZP3与MII卵率及2PN受精率也有非线性相关的关系。ZP2作为次级精子受体,它的水解与防止多精子受精有关,结果也证实2PN受精率与 ZP2呈线性负相关关系:2PN受精率=1.148-6.015×ZP2。虽然ZP3与2PN卵裂数及可用胚胎数呈线性正相关关系,但这可能与其和2PN受精数呈正相关有关。而ZP1对卵母细胞成熟、受精则均无关系,ZP1、ZP2、ZP3与胚胎正常卵裂及发育潜力的关系还暂不能明确。 结论: 卵巢储备功能越好(AMH越高),卵冠丘颗粒细胞中ZP3的表达越多,同时获卵数、MII卵数、MII卵率、2PN受精数、2PN受精率都会随着ZP3的表达增多而增加,而2PN受精率则会随着ZP2的表达增多而下降。卵母细胞成熟度及其正常受精与ZP3的表达呈正相关,卵母细胞正常受精率与ZP2的表达呈负相关。