目的:本课题组前期发现钙网蛋白（Calreticulin，CRT）在鼻咽癌组织中高表达，通过诱导鼻咽癌CNE2细胞发生上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）促进其迁移侵袭。本文旨在探究CRT诱导鼻咽癌CNE2细胞EMT相关信号通路，及其促迁移侵袭的分子机制。　　方法：（1）采用Ensembl在线生物信息学软件预测NRP1的启动子区域序列，然后通过Jaspar软件预测转录因子结合位点，分析TGF-β/Smads信号通路中调控神经纤毛蛋白1（Neuropilin-1，NRP1）表达最佳转录因子。　　（2）将Si-CRT瞬时转染鼻咽癌细胞CNE2细胞（设阴性对照Si-NControl），运用Western blot检测CRT低表达后细胞中SMAD3与其磷酸化、NRP1表达水平。　　（3）利用SMAD3特异性磷酸化抑制剂SIS3处理CNE2细胞，Western blot检测抑制SMAD3蛋白磷酸化后CRT与NRP1表达情况。　　（4）通过Western blot检测CNE2细胞中CRT低表达以及抑制SMAD3磷酸化后EMT相关蛋白E-cadherin和Vimentin表达情况。　　（5）通过划痕实验和Transwell迁移侵袭实验检测CNE2细胞中CRT低表达以及抑制SMAD3磷酸化后对鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响。　　结果：(1)Ensembl软件发现NRP1基因转录起始位点上游2000bp碱基序列（-1～-2000bp）为NRP1启动子区域。经Jaspar软件分析发现TGF-β/Smads信号通路中SMAD3在NRP1启动子区域存在5个结合位点。　　(2)敲低CRT后鼻咽癌CNE2细胞中NRP1与P-SMAD3表达水平显著降低（P=0.000），但SMAD3表达无差异（P=0.240）。　　(3)SIS3抑制鼻咽癌CNE2细胞中SMAD3磷酸化后NRP1蛋白表达明显下调（P=0.020），而CRT表达无显著差异（P=0.140）。　　(4)敲低鼻咽癌CNE2细胞中CRT表达或者抑制SMAD3的磷酸化后，EMT相关蛋白Vimentin显著降低（P＜0.01），但E-cadherin表达增加（P＜0.01）。　　(5)细胞划痕实验结果显示：敲低CRT表达后鼻咽癌CNE2细胞迁移距离为（13.42±3.15）μm，抑制SMAD3磷酸化后CNE2细胞迁移距离为（18.01±2.82）μm，两组间无明显差异（P＞0.05），但均显著低于阴性对照组（60.41±4.00）μm（P＜0.05）。　　(6)Trasnwell迁移实验结果证实：敲低CRT表达后鼻咽癌CNE2细胞迁移细胞计数为（74.03±1.00个/高倍镜视野），抑制SMAD3磷酸化后CNE2细胞迁移细胞计数为（69.02±3.68个/高倍镜视野），两组间无明显差异（P＞0.05），但均显著低于阴性对照组（124.12±5.80个/高倍镜视野）（P＜0.05）。　　(7)Trasnwell侵袭实验结果证实：敲低CRT表达后鼻咽癌CNE2细胞迁移细胞计数为（63.11±6.45个/高倍镜视野），抑制SMAD3磷酸化后CNE2细胞迁移细胞计数为（54.65±6.20个/高倍镜视野），两组间无明显差异（P＞0.05），但均显著低于阴性对照组（96.62±5.68个/高倍镜视野）（P＜0.05）。　　结论：（1）CRT通过促进TGF-β信号通路中Smad3磷酸化调控NRP1表达。　　（2）CRT可经Smad3/NRP1通路诱导鼻咽癌CNE2细胞发生EMT，促进其迁移和侵袭。