RACK1通过RhoA激酶对宫颈癌SiHa细胞的侵袭能力的影响

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目的:1.检测过表达质粒组、空白质粒组、未处理组宫颈癌细胞株SiHa的RACK1、RhoA的表达量,并探讨两者之间的相关性;2.检测不同浓度梯度的RhoA激酶抑制剂处理过表达质粒组、空白质粒组、未处理组宫颈癌细胞株SiHa后RhoA的表达量,并测定其侵袭能力。方法:1.培养SiHa细胞,通过脂质介导,一组转染过表达质粒,一组转染空白质粒,另外一组无任何处理,Real-time qPCR和Western blot两种方法检测三组Si Ha中的RACK1、RhoA的表达量;2.检测不同浓度梯度的RhoA激酶抑制剂处理三组后RhoA的表达量,用transwell小室检测三组侵袭能力是否有变化;3.采用SPSS 16.0软件分析,所有数据均采用均数±标准差(`x±s)形式表示,P<0.05为存在统计学意义。结果:1.PCR检测过表达质粒组中RACK1和RhoA的表达量分别为1.25±0.59、1.36±0.04,Western blot检测过表达质粒组中RACK1和RhoA的表达量分别为0.94±0.08、0.52±0.07,均高于其它两组,空白质粒组与未处理组的RACK1、RhoA的表达量之间无显著性差异。Pearson积差相关系数分析,RACK1、RhoA两者正相关,且相关系数r:0.929、0.601。2.不同浓度梯度的Y-27632抑制三组中RhoA激酶,随着抑制剂浓度的增加,RhoA的表达量及侵袭能力降低。结论:1.在宫颈癌SiHa细胞中成功转染过表达质粒,同时获得稳定过表达RACK1的宫颈癌SiHa细胞;2.过表达RACK1通过RhoA激酶对宫颈癌细胞株SiHa侵袭能力有影响。
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