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目的:通过观察针刺肝俞对睡眠--觉醒周期紊乱小鼠的DEC1mRNA、DEC2mRNA,DEC1、DEC2蛋白表达的影响,研究针刺肝俞对肝内睡眠—觉醒周期的调节作用。方法:将72只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、针刺肝俞组、非经非穴组,共四组,每组18只。在Light:08:00-20:00、Dark:20:00-08:00的开关灯条件下驯化7天,驯化后即实验第8天,采用短时间剥夺协议2h/2h光刺激造模法获得睡眠--觉醒周期紊乱模型,造模5天,确定造模成功后,于实验第13天进行干预:即空白组不予以处置,模型组捆绑,针刺肝俞组与非经非穴组于15:00予以电针干预15分钟,连续电针5天。针刺肝俞组取双侧“肝俞”穴进行毫针针刺,针刺方法为向内下方斜刺0.4cm处,并接通6805-AII型电针仪,电针的输出导线两端分别连接双侧“肝俞”穴,电针刺激参数为:疏密波4/20Hz;疏密周期为6秒,电流调节至鼠尾或者下肢微微抽动即可;非经非穴组选择小鼠双胁下固定的非穴位点,针刺方法同针刺肝俞组。实验第18天早2点(即针刺结束后12小时),每组每隔4小时处死3只小鼠取肝脏组织。全程用360智能摄像机监控,并对实验动物自发站立和活动次数进行记录,结合Real-Time-PCR、Western Blot法观察肝脏内DEC1mRNA、DEC2mRNA节律性表达和对DEC1、DEC2表达量的影响,进而探究针刺“肝俞穴”后对睡眠—觉醒周期的调节作用。结果:1造模后各组C57BL/6J小鼠均出现狂躁不安,兴奋性高、攻击性强等明显行为学改变,站立次数与自发活动次数明显增多、体重增长受到抑制,与造模前比较,均有统计学意义(P<0.05);电针5天后,针刺肝俞组C57BL/6J小鼠的行为学改善,站立次数与自发活动次数明显减少、体重恢复增长,相比模型组与非经非穴组均有统计学意义(P<0.05),与空白组比较则无统计学意义(P>0.05)。2造模后除空白组外,各组小鼠肝内DEC1mRNA、DEC2mRNA出现明显的节律性紊乱,P<0.3。而DEC1、DEC2蛋白表达量则显著减少,与造模前比较,P<0.05,有统计学意义。3电针“肝俞穴”5天后,与模型组比较,针刺肝俞组肝内RT-PCR显示DEC1mRNA、DEC 2mRNA恢复其自主节律性,P<0.3;非经非穴组则仍显示节律紊乱,P>0.3。4电针“肝俞穴”5天后,针刺肝俞组肝内DEC1、DEC2蛋白表达增多,与模型组、非经非穴组比较,有统计学意义(P<0.05);非经非穴组与模型组比较,则无统计学意义(P>0.05)。结论:1电针“肝俞穴”对睡眠--觉醒周期紊乱的C57BL/6J小鼠具有明显的调节作用,可使睡眠--觉醒周期紊乱的C57BL/6J小鼠恢复其自主节律。2电针“肝俞穴”可恢复负反馈调节基因DEC1、DEC2的节律性,并上调DEC1、DEC2的蛋白表达,其机制可能是通过减少觉醒时间、增加睡眠时间参与调控睡眠--觉醒周期。