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Nsa 细胞质雄性不育系是通过对甘蓝型油菜品种中双四号(2n=38)与新疆野芥野油18(2n=18)的对称性体细胞杂种连续回交选育出来的。分子鉴定和恢保关系测定表明,Nsa 不育细胞质与萝卜质和波里马不育胞质完全不同,是一种油菜新型雄性不育细胞质。前期研究结果还表明,Nsa不育系育性稳定性好,不易受温度变化的影响,一旦杂交种选配成功,将会对杂交油菜的安全性生产起到重要的促进作用。由于Nsa是引进了新疆野芥的细胞质成分创建的油菜异源细胞质雄性不育类型,其恢复基因存在于其细胞质的来源种新疆野芥中。广泛测交鉴定后在甘蓝型油菜、白菜型油菜中均未得到其恢复材料,而从甘蓝型油菜和新疆野芥的体细胞杂交组合的可育后代株系中发现了可恢复Nsa育性的单株,经杂交、自交选育获得了性状较为稳定的恢复株系。通过细胞学观察研究Nsa不育系的雄性败育过程以及恢复系的染色体组成,明确Nsa不育系雄性败育特征,探明恢复系的遗传组成,对继续研究Nsa不育系统的育性调控机理、选育优良恢复系均具有重要的理论和实践意义。
本研究通过细胞解剖学方法观察了Nsa花药发育的超微结构特点,明确了其雄性发育的败育时期和败育原因;研究了Nsa细胞质雄性不育恢复系的染色体组成及恢复基因的可能来源,为正确认识和利用Nsa不育系统进行杂种选配提供了有价值的信息。主要研究结果如下:
1.超微切片显示Nsa花药的发育受阻于花粉母细胞减数分裂时期,属于花粉母细胞败育类型。其特点是:Nsa的花药在花粉母细胞减数分裂时期就开始败育,在四分体时期败育现象最为严重,有少许花粉母细胞能发育到单核时期,但是最终也降解了。绒毡层在花粉母细胞早期就开始降解,至四分体时完全退化。中层在花粉母细胞减数分裂时期就已经完全降解。中层的极早退化可能影响到了绒毡层的退化,而绒毡层的解体最终导致了花粉母细胞的败育。
2.恢复系的染色体数目为40条,而且自交后代植株间性状基本一致,说明恢复系体细胞染色体的总条数已经稳定;减数分裂时期,大部分终变期细胞的染色体组成为20个二价体(20Ⅱ),表明所有的染色体能完成正常的同源染色体配对;在中期和后期,虽然出现了较低比例的一对染色体落后甚至是染色体桥现象,但是正常分裂的细胞占有绝大多数;在后期,几乎所有的细胞都是成20+20染色体分离,说明恢复系中的两条附加染色体来自于同源染色体,在甘蓝型油菜中可以正常配对和分离,从而使恢复材料能够稳定遗传。这些证据表明,Nsa恢复系材料是一个相对稳定的材料,完全可以用于组配杂交组合。
3.恢复系的体细胞染色体条数为40条,比甘蓝型油菜的染色体条数(38条)多出两条,减数分裂时期在少数终变期细胞中发现两个单价体,后期分离时也有少数细胞出现一对染色体落后现象,通过基因组原位杂交证实,恢复系材料为二体异附加系,有两条染色体来自野油18。
4.在5个农艺性状较好的恢复株系中,7329和7335材料的稳定性更好。