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目的：胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,而肝转移是晚期胃癌患者死亡的最主要原因,而当前的抗转移治疗仍不能获得满意效果。人嗅觉介导素4(OLFM4),即Olfactomedin4基因,又称抗凋亡分子GW112,在多种肿瘤中高表达,且在肿瘤的发生发展过程中起非常重要的作用。目前研究表明OLFM4是一种胃癌细胞特异高表达基因,其表达与胃癌细胞侵润、转移、分化程度显著相关,GW112过表达具有促肿瘤细胞生长,抗凋亡功能。近几年大量研究表明,NF-κB与肿瘤细胞的发生、增殖、分化、凋亡、侵袭和转移有密切关系。本研究主要探讨慢病毒介导OLFM4基因沉默对胃癌肝转移的作用以及其调控胃癌转移发生、发展的初步机制。方法：在我们以前的研究中,以确定OLFM4在胃癌细胞MKN-45中高表达,因此我们选择MKN-45细胞株来建立OLFM4敲减的稳定细胞模型。构建干扰慢病毒(OLFM4-RNAi-LV)和阴性对照慢病毒(NC-GFP-LV)载体,经DNA测序鉴定后用此质粒转染人胚胎肾细胞HEK-293T细胞包装病毒和滴度测定,获得高滴度慢病毒。用OLFM4-RNAi-LV和NC-GFP-LV感染胃癌细胞MKN-45,经流式细胞仪分选得到高纯度GFP+细胞株,Real-time PCR和Western blot分别检测OLFM4mRNA和其蛋白的表达水平,鉴定OLFM4敲低效果。为了检测OLFM4敲减后MKN-45细胞对体外侵袭和体内转移的影响,我们在体外用Transwell法测定MKN-45细胞体外迁移和侵袭能力,体内建立裸鼠肝转移动物模型。将高纯度细胞(MKN-45-NC-GFP和MKN-45-Si-OLFM4)对裸鼠分别进行腹腔注射和尾静脉注射来建立腹腔转移和肝转移动物模型。计数肠系膜和肝脏表面肿瘤结节的数量,分析其转移能力,转移肿瘤组织通过HE染色来确认。为了探索OLFM4敲减可能抑制或促进MKN-45细胞转移的机制,通过Western blot检测NF-κB信号通路的相关蛋白表达,用EMSA法测定NF-κB DNA结合活性。人肿瘤转移Real-time PCR芯片检测MKN-45细胞OLFM4基因沉默后肿瘤转移的相关基因改变。结果：成功构建干扰慢病毒OLFM4-RNAi-LV和阴性对照慢病毒NC-GFP-LV。流式细胞仪分选得到GFP+细胞株荧光率高达90%以上,Real-time PCR和Western blot结果显示,与MKN-45-NC-GFP相比,MKN-45-Si-OLFM4细胞中mRNA和其蛋白的表达明显降低(P<0.01)。体外Transwell实验结果显示,胃癌MKN-45细胞OLFM4敲减后,其迁移和侵袭能力明显减弱。体内裸鼠转移模型研究结果显示,OLFM4敲减的MKN-45组肝脏和肠系膜肿瘤结节数明显减少,与MKN-45-NC-GFP相比,MKN-45-Si-OLFM4细胞的肝脏和肠系膜转移力明显被抑制(P<0.01)。Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白结果显示,与MKN-45-NC-GFP相比,MKN-45-Si-OLFM4细胞的NF-κB通路相关蛋白表达明显降低(P<0.01)。EMSA实验结果显示,与阴性对照相比,MKN-45-Si-OLFM4细胞与NF-κB DNA的结合活性明显被抑制。人肿瘤转移Real-time PCR芯片检测结果显示,敲低OLFM4后MKN-45细胞中CCL7、CDH1、MGAT5、KISS1、MTSS1和PTEN等转移相关基因表达发生了明显改变。结论：我们的研究结果显示,慢病毒介导OLFM4沉默能明显抑制胃癌细胞的体外迁移和侵袭能力以及体内胃癌腹腔和肝脏转移能力,表明OLFM4在胃癌进展过程中起着重要作用。我们的结果还发现,敲减OLFM4抑制了NF-κB信号转导通路的NF-κB DNA结合活性和其相关蛋白表达。这些结果表明,敲低OLFM4能反馈调控NF-κB信号转导通路而调控胃癌肝转移过程。而且,CCL7、CDH1、MGAT5、KISS1、 MTSS1和PTEN等转移相关基因可能也参与了胃癌细胞侵袭和转移过程。因此,抑制OLFM4基因表达可能会成为控制胃癌侵袭和肝转移的潜在治疗策略。