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背景：神经血管单元包括神经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞，这强调了其作为一个整体维持脑正常功能的重要性。星形胶质细胞作为维持神经血管单元功能的关键环节，广泛存在着由缝隙连接蛋白43(connexin43, Cx43)构成的缝隙连接通道，它形成细胞间重要的信息传递通路。缺血性脑卒中是由于脑血流中断破坏局部脑组织的能量供给，导致神经血管单元功能障碍，此时Cx43必然发生相应的变化。Cx43在其生命周期中受多种因素的调节，其向细胞内转运及降解的途径不甚清晰。而且Cx43作为胞膜蛋白，向细胞质内的转运是否与胞吞作用有关尚不明确。Cx43在合成过程中是借助微管运输系统被转运到细胞膜上的，那么它向细胞质内的转运是否也与微管运输有关有待于进一步研究。细胞内蛋白的降解主要通过自噬溶酶体途径和泛素-蛋白酶体系统途径完成，Cx43向细胞质内的转运可以被脑缺血激活，通过活化蛋白激酶信号通路，改变磷酸化状态，最终使其发生降解，影响缝隙连接胞间通讯的功能，但具体机制目前并不明确，这也成为该领域的研究热点。目的：观察大鼠星形胶质细胞Cx43在糖氧剥夺/复氧复糖（ischemia/reperfusion;oxygen-glucose deprivation/reoxygenation; I/R）条件下数量和质量方面的变化规律，并进一步探讨其变化的机制。方法：采用连续传代法体外纯化培养大鼠星形胶质细胞，通过调节培养箱参数及更换无糖培养液建立其I/R模型。糖氧剥夺2h后，分别复氧复糖0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、72h，采用Western blotting方法对Cx43进行定量分析，通过Western blotting及RT-PCR方法分析EB1在蛋白和基因表达量方面的变化。使用MTT比色法选择细胞损伤最重的时间点，设立正常培养组、I/R Saline对照组、I/R甘珀酸干预组，采用激光共聚焦显微镜观察Cx43分布的变化；dynasore阻断胞吞作用后，再次于激光共聚焦显微镜下观察Cx43的分布变化。同时，设立正常培养组、I/R组、I/R TPA组、I/R MG132组、I/R TPA+MG132组，采用Westernblotting方法对p-Cx43（Ser368）、p-ERK1/2、Beclin1蛋白进行定量分析。结果：(1)成功建立了星形胶质细胞纯化体系及其糖氧剥夺/复氧复糖模型。（2）Western blotting结果提示I/R后各个时间点的Cx43总量并未发生改变（P>0.05）。（3）MTT法提示I/R后6h细胞受到的损伤最严重，此时使用激光共聚焦显微镜观察发现Cx43发生了内在化，即细胞膜上分布减少，而细胞质内分布增多(P<0.05)。（4）甘珀酸阻断缝隙连接后，并不影响Cx43的表达量(P<0.05)。（5）Dynasore可以部分性抑制Cx43的内在化，较对照组相比，Cx43的内在化减少了29.2%（P<0.05）。（6）EB1的蛋白和基因相对表达量在各组间无明显差异(P>0.05)。（7）I/R6h后：p-Cx43（Ser368）较正常培养组减少（P<0.01）；TPA长时间影响PKC活性，出现p-ERK1/2、Beclin1表达水平降低，p-Cx43（Ser368）表达水平增加（P<0.01）；MG132作为蛋白酶体抑制剂，使得p-Cx43、p-ERK1/2、Beclin1表达量均增加（P<0.01）。结论：（1）成功建立了大鼠星形胶质细胞纯化体系及糖氧剥夺/复氧复糖模型。（2）糖氧剥夺/复氧复糖后，Cx43的总量并未发生变化，只是发生了向细胞内的转移即内在化。（3）Cx43的内在化过程与胞吞作用有关，与微管运输无关。（4）糖氧剥夺/复氧复糖后，Cx43通过ERK1/2途径发生Ser368位点的磷酸化，并经溶酶体途径降解。（5）Cx43的降解过程与泛素-蛋白酶体途径有关。