中药九香虫鉴定方法的系统研究

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九香虫为蝽科昆虫九香虫Aspongopus chinensis Dallas的干燥体,具有理气止痛,温中助阳的功效,用于胃寒胀痛,肝胃气痛,肾虚阳痿,腰膝酸痛。目前市场上九香虫与其相似品混用、误用现象时有发生,其真实性、纯度和品质优良度问题备受关注。规范九香虫药材市场管理,完善其质量品质评价体系,对确保药材的真实性和有效性具有重要意义。目的:对中药九香虫及其相似品进行资源调查和品种鉴定,制定九香虫药材商品规格等级标准,建立性状、显微、理化和分子鉴定等方法相结合的鉴定体系,为九香虫药材的准确鉴定和质量评价提供科学依据。方法:(1)通过产地和市场调查,掌握九香虫类药材的资源分布情况。并对收集到的九香虫药材以外观性状指标进行测量和分析,制定九香虫药材商品规格等级标准。(2)运用动物分类学、性状鉴定、生殖器鉴定、微性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱检识等方法建立九香虫基本鉴定体系。(3)基于COI序列的DNA条形码和线粒体全基因测序等方法建立九香虫分子鉴定方法。(4)基于GC-MS技术分析脂肪油类成分,基于HPLC-衍生化方法分析九香虫多糖组成,探索以成分为基础的九香虫鉴定方法。结果:(1)调查并鉴定九香虫及性状相似的8种蝽科相似品。并初步建立了中药九香虫商品规格等级标准。(2)总结了九香虫及其相似品的性状特征、生殖器特征、以及以腹背板为主要鉴定依据的微性状和显微特征等。(3)基于COI序列的DNA条形码鉴别结果显示,除黑兜虫外各品种能较好区分;通过线粒体全基因测序发现九香虫有两种区别较大的线粒体基因组成。(4)利用GC-MS技术测得九香虫与其相似品的脂肪油组成基本相似,通过脂肪油指纹图谱相似度分析和系统聚类分析,发现除荔蝽外,九香虫与其相似品较难用脂肪油的组成进行鉴别。对其多糖组成进行分析,发现小皱蝽的多糖含量相对偏高,其次为无刺蝽;九香虫、黑兜虫、荔蝽和无刺蝽的多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等单糖组成,而小皱蝽的多糖主要由葡萄糖组成;从主成分分析来看,除黑兜虫外,其他品种能聚合为一类,能与九香虫较好地鉴别。结论:基于性状、显微、理化和分子鉴定等方法相结合的系统鉴定方法,能较好鉴别除黑兜虫以外的九香虫相似品,九香虫可能存在隐存生物多样性。利用多糖组成分析的方法,可用于九香虫类药材的品种鉴定。
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