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目的 探究机械敏感离子通路Piezo1是否通过调控驱动蛋白Kif18A表达改变细胞骨架蛋白进而影响细胞的分裂增殖。方法 制备干扰Piezo1表达的FAM38A-sh RNA慢病毒载体,体外转染骨关节炎患者软骨细胞,筛选有效干扰Piezo1表达的序列作为慢病毒载体干扰组(C组),同时设立空白对照组(A组)、慢病毒空载体组(B组)、慢病毒干扰序列(LV3-Pie zo1-homo-3201)组(C组)、Kif18A药物阻断组(D组)、慢病毒干扰序列(LV3-Piezo1-homo-3201)+Kif18A药物阻断组(E组)。根据预实验获得的预知结果用多通道细胞机械牵张应力加载系统FX-4000T分别周期作用各组实验细胞组0h、2h、12 h、24 h、48 h。在光学显微镜下在不同时间观察细胞形态变化,采用cck8试剂盒测定细胞增殖,RT-PCR和Western-Blot检测相关基因Piezo1、β-tubulin、Ki f18A的转录和蛋白翻译表达水平。结果 慢病毒干扰载体LV3-Piezo1-homo-3201序列组Piezo1目的基因相对表达量明显下降,干扰效果显著(P<0.05)。病毒载体本身对细胞增殖的影响:Kif18A抑制剂组及Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组的增值率明显低于空白对照组及FA M38A-sh RNA干扰组(两两比较,P<0.05)。空白对照组增值率先增后减,FAM38A-sh RNA干扰组增值率基本不变。在12h应力下,Kif18A抑制剂组及Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组的增值率差异较大(P<0.05),其余加力时间下无差异(P>0.05)。FAM38A-sh RNA干扰组及Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组Pi ezo1的基因相对表达量在每一时间点都明显低于空白对照组,慢病毒空载体组及Ki f18A抑制剂组(P<0.01),不同应力时间亚组基因相对表达量差异较小。在24h及48h加力周期下Kif18A抑制剂组的表达量明显低于空白对照组和慢病毒空载体组的(P<0.05)。Kif18A抑制剂组及Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组较空白对照组目的基因Kif18A的表达量明显降低(P<0.01),且Kif18A抑制剂+FAM38A-shRNA干扰组基因表达量低于Kif18A抑制剂组(P<0.05)。FAM38A-sh RNA干扰组较空白对照组目的基因的表达量明显降低(P<0.05)。各实验组β-Tubulin的表达特点:各组在24h及48h应力作用下基因的表达量无差异(P>0.05),且空白对照组和慢病毒空载体组的表达量高于0h、12h、24h应力下的表达量。Kif18A抑制剂组及Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组较空白对照组目的基因的表达量明显降低(P<0.01),且Kif18A抑制剂+FAM38A-sh RNA干扰组基因表达量低于Kif18A抑制剂组(P<0.05)。FAM38A-sh RNA干扰组较空白对照组目的基因的表达量明显降低(P<0.05)。结论 LV3-Piezo1-homo-3201病毒干扰序列可用于特异性干扰Piezo1的合成。机械敏感离子通道Piezo1可感受生物应力作用后激活Kif18A破坏细胞骨架结构蛋白进而抑制细胞的分裂增殖,影响关节软骨的结构和功能。