【摘 要】
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目的:研究大麻素WIN55,212-2对体外培养的牛眼小梁细胞前列腺素E2(PGE2)表达的影响,从而探讨大麻素WIN55,212-2可能的降眼压机制。
方法:1、牛眼小梁细胞的培养与鉴定:采用
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目的:研究大麻素WIN55,212-2对体外培养的牛眼小梁细胞前列腺素E2(PGE2)表达的影响,从而探讨大麻素WIN55,212-2可能的降眼压机制。
方法:1、牛眼小梁细胞的培养与鉴定:采用组织块培养法对牛眼小梁细胞进行原代培养,取第三代细胞使用免疫组织化学法对培养的小梁细胞神经元特异性烯醇化酶(NSE)、波形蛋白及第Ⅷ因子相关抗原的表达进行鉴定。2、ELISA法测定小梁细胞上清液中PGE2浓度:将培养于96孔板的第四代细胞随机分为7组,每组10个复孔,分别施加含大麻素WIN55,212-2终浓度为0μmol/L,0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,60μmol/L的不含血清培养液,培养24小时后运用酶联免疫吸附(ELISA)法测定不同浓度大麻素WIN55,212-2作用后牛眼小梁细胞上清液中PGE2水平的变化情况。3、RT-PCR测定细胞内PGE2mRNA的表达:取第四代小梁细胞,运用反转录聚合酶链式扩增(RT-PCR)方法检测含大麻素WIN55,212-2终浓度为0μmol/L,0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,60μmol/L的含血清培养液作用后24小时PGE2mRNA在小梁细胞内的表达水平。
结果:经含0μmol/L,0.1μmol/L,1μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L,60μmol/L不同浓度大麻素WIN55,212-2的培养液作用后牛眼小梁细胞上清液中的PGE2水平与细胞内PGE2mRNA水平随大麻素浓度变化呈剂量依赖性升高。
结论:一定剂量的大麻素可以促进牛眼小梁细胞分泌PGE2。
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