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目的:观察环孢菌素A(Cyclosporin A,CsA)对大鼠磨牙牙龈上皮面积和最长钉突长度以及细胞凋亡、凋亡相关蛋白bcl-2和caspase-3表达的影响。
方法:60只7周龄健康雄性Wistar大鼠被随机分为10、20、30和40天4组,每组15只(胃饲含CsA鲜牛奶10只;胃饲等量鲜牛奶5只)。制作下颌第一磨牙石蜡切片后,分别行HE染色、bcl-2和caspase-3免疫组化染色及TUNEL染色。应用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统、SPSS13.0软件和完全随机分组两因素析因设计方差分析法,定量分析CsA对牙龈上皮面积和最长钉突长度的影响;定性分析CsA对牙龈上皮凋亡及bcl-2和caspase-3表达的影响。
结果:
1、组织测量结果:实验组颊侧和舌侧牙龈上皮面积以及颊侧最长钉突长度在各时间点均显著大于对照组(颊侧P<0.01,舌侧0.01
0.05)。在本实验周期内,实验组间牙龈上皮面积增大无明显差异(P>0.05)。伸长增宽的上皮钉突主要位于附着龈近膜龈联合处。 2、免疫组化结果:bcl-2阳性表达于口腔龈上皮棘细胞层胞浆内和核膜上,caspase-3阳性表达于口腔龈上皮、沟内上皮和结合上皮颗粒细胞层胞核内和胞浆内。与对照组相比较,实验组bcl-2阳性表达范围和表达密度增大,caspase-3阳性表达不均匀减少,在上皮钉突伸长增宽明显部位变化尤为显著;牙龈上皮尤其是口腔龈上皮凋亡细胞减少。 结论: 1、CsA使大鼠口腔龈上皮增厚,这种增厚具有部位特异性,即颊侧附着龈近膜龈联合处是CsA作用于大鼠牙龈的主要靶部位。 2、CsA使大鼠口腔龈上皮线粒体凋亡途径受到干扰,细胞凋亡受到抑制是CsA使大鼠口腔龈上皮增厚的发生机制之一。