本试验以屠宰场废弃的猪卵巢卵母细胞为试验材料，主要对有腔卵母细胞的采集、卵母细胞体外成熟培养、第一极体(PbI)的排出时间、保存、活性鉴定以及分离方法、PbI重组MⅡ期卵母细胞的显微操作术、重组卵母细胞的体外受精(包括单精子胞质内显微注射)及其受精卵体外发育培养等进行了较系统的探索性研究，以期初步建立一整套猪PbI的分离、保存、重组、体外受精与体外发育的系统技术程序，为进一步深入开展猪和其他动物极体基因资源的研究及利用奠定基础。取得主要结果如下： 1.建立了猪卵巢卵母细胞体外成熟、体外受精及其胚胎体外发育培养系统与技术。探讨了不同发育阶段(直径大小)卵泡卵母细胞、不同培养系统与添加成分以及不同培养时间等关键因素对猪卵母细胞WM的影响。实验证明，采用mTCM199作为基础成熟培养系统液，并添加Φ5-8 mm卵泡液(pFF)和雌二醇(E2)，Φ2-8 mm卵巢卵泡COCs经IVM40h可得到较高的成熟率和IVF后体外发育卵裂率。 2.建立了一套猪PbI保存和活力(细胞化学与形态学)鉴定的方法。分别对体外成熟培养过程中卵母细胞排出PbI规律、极体活性及其形态学变化进行了观察、分析与评价；发现卵泡卵母细胞IVM40h后可得到大量高活性PbI；39℃条件下大多数采集的PbI存活时间仅有4 h，4℃条件下保存40 h存活率可达85.0％；-20℃保存1 wk达95.0％，而超低温冷冻长期保存存活率和形态正常率分别达89.1％和97.8％。 3.利用显微操作技术，建立了猪PbI的分离以及PbI与卵母细胞重组的方法。Pbl分离后将其核物质显微注射入去核卵母细胞胞质内，重组卵母细胞。结果表明，显微操作分离极体效果显著优于酶消化法，且分离的PbI活力高，完整性好；使用含CCB的DPBS操作液可以得到重组成功率达87.2％。 4.建立了猪新鲜和冷冻的PbI重组卵母细胞体外受精及其胚胎体外发育培养系统与技术，成功地获得了猪重组卵母细胞体外受精后的2=细胞和4-细胞胚胎。实验结果表明，新鲜和冷冻PbI重组卵母细胞后均可以进一步发育。新鲜PbI组重组卵母细胞常规体外受精(IVF)和单精子注射(ICSI)受精后卵裂率分别为12.9％和29.8％；冷冻PbI组重组卵母细胞平均卵裂率为17.5％。