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猪瘟是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的一种高度接触性传染病,对养猪业危害严重,可造成巨大损失,被国际兽疫局(Office International des Epizooties,OIE)列为A类传染病。猪瘟病毒遗传分型(Genetic Typing)是追踪CSFV 传播、变异以及持续性感染等极为有效的方法,CSFV的E2基因是国际上通用的用来进行猪瘟病毒遗传分型的区域之一。2006年至2007年期间,从广东省各地采集病、死猪的脾脏、淋巴结、扁桃体,用RT-PCR的方法扩增猪瘟病毒的E2基因,用国际通用的进化分析软件PHYLIP对这5株病毒进行遗传分型,结果显示这5株CSFV均属于基因2.1亚群。推测广东省猪瘟病毒流行毒株目前主要以2.1亚群为主。
为了有效开展对CSFV疫苗抗体的血清学调查,建立一种快速简便的抗体检测方法,利用分子生物学技术,PCR扩增CSFV兔化弱毒株ABCD抗原结构域基因,并构建pET-32a(+)-ABCD表达载体,采用大肠杆菌表达系统,将CSFV疫苗株E2基因的ABCD抗原结构域进行体外表达,纯化后的重组蛋白作为胶体金免疫层析(Gold immunochromatographic assay,GICA)试纸的金标抗原和捕获抗原,筛选合适的余标耗材,初步研制出了具有一定敏感性和特异性的检测CSFV抗体的胶体金免疫层析试纸。