链霉菌XBP-03次级代谢产物活性成分的分离纯化及结构鉴定

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loop000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
实验室前期从我国西部地区分离得到一株链霉菌,代号XBP-03,其发酵产生的次级代谢产物对多种病原菌具有抗菌活性。本论文重点进行了链霉菌XBP-03的次生代谢产物活性成分的分离纯化和结构鉴定的研究;另外,本论文还研究了用大孔吸附树脂分离枯草芽孢杆菌发酵液中的伊枯草菌素A。论文由三部分组成:   第一部分:链霉菌XBP-03的发酵液中抗菌活性物质的早期鉴别和分离纯化的研究。以蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus Ym1004)为生物活性检测供试菌株,以抑菌活性为指示,全程跟踪指导活性化合物的分离纯化。管碟法测定发酵液的效价,其效价单位相当于四环素5498.4μg;发酵液经过树脂脱色、有机溶剂沉淀除去大量色素和杂蛋白,减压蒸干得到活性物质的粗品,粗品理化性质实验结果表明,活性物质属于碱性水溶性抗生素类,极易溶于水,微溶于甲醇,且具有很好的温度和酸碱稳定性。通过以上实验完成了对发酵液中活性物质的早期鉴别,为进一步分离纯化奠定基础。经过大量筛选,确定TLC展层剂为X∶Y∶水,实现发酵液中活性物质的快速分析,确定了柱层析方法。粗品经过反复正相硅胶层析和高效液相色谱制备等步骤,分离得到两个纯化合物XBP-03-A、XBP-03-B。生物活性测定结果显示,XBP-03-A的抑菌活性较强,XBP-03-B的抑菌活性极其微弱。   第二部分:链霉菌XBP-03的次级代谢产物活性成分的结构鉴定研究。两个纯化合物的双缩脲反应显示,XBP-03-A含有至少两个酰胺键;XBP-03-A、XBP-03-B的紫外吸收峰特性与胞嘧啶核苷类化合物的类似;高分辨质谱给出XBP-03-A的分子量为443,XBP-03-B的分子量为287,它们都含有奇数个氮原子;分析XBP-03-A、XBP-03-B的1H、13CNMR(1D-NMR)、1H-1HCOSY、HSQC、HMBC以及H-HNOESY谱,并结合分析质谱和其它波谱结果,初步确定了XBP-03-A的是一种胞嘧啶核苷二肽,其化学结构与谷氏菌素相同,XBP-03-B的化学结构是胞嘧啶葡萄糖醛酸;通过文献调研,推测XBP-03-B可能是XBP-03-A生物合成的一个中间体。   第三部分:大孔吸附树脂分离枯草芽孢杆菌发酵液中的伊枯草菌素A的研究。对比不同极性大孔树脂对发酵液中伊枯草菌素A的分离效果,选择DM301型树脂作为吸附剂进行优化实验。结果表明,在25℃时,吸附剂用量为80g/LDM301型树脂时,树脂对发酵液中伊枯草菌素A的吸附率可达100%。滤去吸附残液,采用无水乙醇解吸,解吸剂用量为10ml/g干树脂,静态解吸率达90%以上。动态吸附试验表明,发酵液的最佳上样量为6倍柱床体积,动态解吸流出液活性高度集中。该工艺简单、易操作,适用于工业化生产。
其他文献
党群关系关乎着一个政党的兴衰存亡,也是政党得以发展的动力和基石。在新的历史条件下,公民社会的兴起和发展给政党与群众的关系带来新的挑战和机遇。本文从政治学视角出发,
【本刊讯】由中国岩石力学与工程学会岩石破碎工程专业委员会、中国金属学会采矿学会岩石破碎学术委员会、中国钢结构协会钎钢钎具协会等单位联合召开的第六届全国岩石破碎学
中学是培育学生的基地,而英语是一门非常重要的基础课程.目前中学的英语教学仍然以传统的自然班为授课单位,全部按年级进行分班教学的“一勺烩”教学,这种不管学生的入校英语
针对小型矿山扩建延深工程的特点,对开拓方式的选择及中段运输巷道的布置进行了探讨。 In view of the characteristics of small-scale mine extension and extension proje
该文主要通过离体与整体方法,研究了肠道内细菌对淫羊藿甙的代谢作用,并采用了免疫分子生物学手段对淫羊藿甙及其肠菌代谢产物对巨噬细胞免疫调节作用进行了比较性研究.
研发结构和机制新颖、低毒、高效的抗癌药物一直是药物化学研究的热点。脂与蛋白的双重激酶磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游的蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶标蛋白(mTO
项目概述  花生豆腐国内首创,经特殊工艺精制而成, 1斤花生可以产13斤豆腐,不含任何添加剂,纯绿色食品,外观洁白细嫩,润泽爽滑,口感鲜美,清香怡人。同时对预防心血管疾病;延缓人体衰老;促进儿童骨骼生长;增强记忆等都有很好的功效。产品面市后深受广大客户的欢迎。  项目特点  1.出品率高。1斤花生出13斤豆腐,保鲜期更长。还能把豆渣加工成畅销产品,综合利用率100%。  2.口感好。花生豆腐低糖、
目的:探讨microRNA-101a(miR-101a)对长期心肌梗死大鼠心肌纤维化的治疗作用与机制  方法:运用冠状动脉结扎法建立大鼠心肌梗死模型,向心梗大鼠在体注射表达miR-101的腺病毒,应
本文针对鸡冠咀金矿二期采区矿体(群)延深较大、走向不长、在垂向上中部较厚、品位较高呈“菱形”变化的特点,通过技术经济比较和岩石力学研究论证,并结合国內、外类似矿山的
自信心是学生走向成功的重要精神动力,增强学生的自信心,培养学生的学习兴趣,是学生有效学习的前提。教师必须按照学生的认识规律和心理特点,选择适应学生的教学方法,指导学生学习,使学生学会学习。更应该要注意培养和保护学生的自尊心、自信心,提高教学效果。  声乐教学是教师与学生面对面地上课,教师与学生之间的关系如同家庭成员之间的平等亲密的关系,这种关系处理得好,教学效果就会明显,处理得不好,师生关系紧张、