荧光定量PCR法分析小腿慢性静脉性溃疡表面的细菌分布

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目的:小腿慢性静脉性溃疡表面的细菌在溃疡的愈合过程中起重要作用,但细菌的种类、密度与溃疡愈合的关系仍然存在争议。本实验探讨小腿慢性静脉性溃疡中的常见菌群种属与溃疡愈合的关系。方法:所有入选的小腿慢性静脉性溃疡患者均进行标准的加压疗法治疗,患者经过6个月的随访以确定溃疡的愈合率,6个月内完全愈合并且在愈合后1个月内没有复发的溃疡被分到愈合组。获取治疗前所有溃疡的组织样本,提取样本中的细菌基因组DNA,合成细菌的通用引物及下肢慢性静脉性溃疡中常见细菌种属(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、表皮葡萄球菌、肠球菌属、消化性链球菌属、拟杆菌属)的特异性引物,运用常规PCR及荧光定量PCR方法比较愈合组与未愈合组溃疡表面的细菌差异。结果:在每一个标本中都检测得出细菌,在愈合组和未愈合组中,最常见的细菌都是金黄色葡萄球菌(分别占67.9%,57.1%)、铜绿假单胞杆菌(分别占35.7%,42.9%)。运用荧光定量PCR比较两组中的细菌总量、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌数量的差异,与愈合组相比,未愈合组标本中的细菌总量明显增多;而两组中金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌的数量并没有明显的差异。结论:在本实验中,没有任何一种CVLU常见细菌种属被证明与溃疡的愈合有直接关系,而CVLU中的细菌总量与溃疡的愈合有很大的联系。本研究提示:CVLU表面细菌总量的增高及细菌生物被膜引起的皮肤的慢性感染可能是导致CVLU长期不愈合的重要原因。
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