目的:接骨草为民间治疗骨折、跌打损伤、活血化癖的常用中草药;分布广泛,资源丰富;但目前国内外研究较为薄弱,以致至今未被《中国药典》及贵州地方标准所收载,阻碍了其进一步开发利用。本课题在查阅文献及前期预实验基础上采用植物化学手段定点分离接骨草中目标组分并对其结构进行鉴定;在获得目标成分基础上,建立接骨草药材中多指标成分同时测定、指纹图谱和总多酚含量测定方法,进而对贵州不同产地的15批接骨草进行分析。此外,按照《中国药典》的技术指导原则开展性状、显微和薄层鉴别;水分、灰分(总灰分和酸不溶性灰分)、浸出物及铅、镉、汞、砷、铜和9种有机氯农药残留量等相关项目的检测。通过此项工作完善接骨草药材的质量标准,力争将其收载入相关标准,为接骨草的质量控制及后期深入研究奠定科学依据,进而为促进接骨草在贵州的产业化发展奠定基础。方法:1.以贵州资源调查为基础,使其采集的接骨草药材具有代表性并依据《中国植物志》、《中华本草》等书籍及具有鉴定资质的专家进行品种资源鉴定;2.以代表性药材为对象,在预实验基础上采用硅胶柱色谱法、制备型高效液相色谱仪等手段定点分离接骨草药材中量大组分,并采用核磁共振等手段进行结构鉴定;3.采用HPLC法和UV法分别建立接骨草3个指标同时测定及总多酚含量测定的方法并进行方法学验证;4.建立15批不同产地接骨草药材的HPLC指纹图谱,指认其中的共有峰,建立共有模式,计算各批药材的相似度,通过聚类分析和主成份分析找出各批药材之间差异;5.按照《中国药典》要求完善质量标准研究,包括性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、重金属、有机农药残留量及性味归经、功能主治、用法用量、注意事项及贮藏等内容,并制定其起草说明。结果:1.采集并鉴定了贵州不同产地的15批接骨草样品,经鉴定确定了其来源均为忍冬科(Sambucus chinensis Lindl.)接骨木属植物接骨草的干燥全草;2.定点分离的两化合物的结构分别为山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-O-β-D-(2-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷;3.测定的15批接骨草中绿原酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷、山奈酚-3-O-βO-D-(2-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷的总含量范围为0.11～3.37mg.g-1;不同产地、不同药用部位接骨草中总多酚含量差异较大,同批次接骨草中总多酚含量依次为叶>全草>茎>根;且抗氧化能力与浓度呈现剂量关系,其抗氧化顺序为叶>全草>茎>根,且与提取物总多酚含量顺序一致,表明其抗氧化能力与总多酚含量有关;4.建立接骨草药材的指纹图谱测定方法,相似度范围为0.88～0.99之间,结合主成分分析和聚类分析结果显示所收集样品指纹图谱总体上质量较为一致,相似度较高,但由于接骨生长环境的差异,导致样品之间相似度仍有较大的差异并指认了其中3个共有峰,分别为绿原酸、山奈酚-3-0-β-D-(6-0-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷、山奈酚-3-O-β-D-(2-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。5.制定了接骨草药材的性状鉴别及显微鉴别的方法;建立了基于接骨草中绿原酸和山奈酚的TLC法鉴别方法;15批接骨草的水分含量在5.93～8.32%之间;总灰分含量在6.54～10.61%之间;酸不溶性灰分含量为0.05～2.55%之间;水溶性浸出物含量在17.84～27.43%之间;醇溶性浸出物含量在15.53～23.62%之间;Hg的范围为 0.062～0.101 mg·Kg-1,As 的范围为 0.039～1.364 mg·Kg-1,Cu 的范围为3.502～10.500 mg·Kg-1,Cd 的范围为 0.073-0.414 mg·Kg-1 Pb 的范围为4.102～14.750 mg·Kg-1;绿原酸含量为0.04～0.46%;6.起草并拟定黔产接骨草药材的质量标准草案及起草说明。结论:1.对定点分离出两目标化合物结构为山奈酚-3-O-βD-(6-O酌乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷和山奈酚-3-0-β-D-(2-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷;2.建立了多指标同时测定、指纹图谱和总多酚含量测定的方法,从系统和宏观角度出发全面评价了接骨草质量,在此基础上全面系统拟定黔产接骨草药材的质量标准,从而为促进接骨草在贵州的产业化发展奠定基础。