【摘 要】
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非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒（African Swine Fever Virus,ASFV）引起的烈性传染病。猪被强毒株感染后在7-10天内会引起猪的死亡。随着人们对病毒研究的逐渐深入,病毒结构的解析,病毒的侵染方式也得以了解。人们发现被ASFV感染并存活的猪对于该种病毒具有免疫力,这种现象使人们确信疫苗将会是预防非洲猪瘟病毒的有效方式。在前人的研究中,对于非洲猪瘟病毒疫苗的设计从减活疫苗到亚单位
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非洲猪瘟是一种由非洲猪瘟病毒（African Swine Fever Virus,ASFV）引起的烈性传染病。猪被强毒株感染后在7-10天内会引起猪的死亡。随着人们对病毒研究的逐渐深入,病毒结构的解析,病毒的侵染方式也得以了解。人们发现被ASFV感染并存活的猪对于该种病毒具有免疫力,这种现象使人们确信疫苗将会是预防非洲猪瘟病毒的有效方式。在前人的研究中,对于非洲猪瘟病毒疫苗的设计从减活疫苗到亚单位疫苗再到m RNA疫苗,病毒蛋白的选取也多种多样。但是这些疫苗都未能取得较为理想的实验结果。布鲁诺·埃尔纳兹等人的研究证实了病毒的侵染主要是无特异性的巨胞饮,所以单纯的介导抗体免疫并不会对非洲猪瘟病毒攻击起到良好的保护效果,我们推测需要产生足够强烈的细胞免疫才可以起到保护效果。本实验室的前期研究表明了全酵母疫苗的灌胃已经将抗原递送到小鼠肠道上皮细胞中,但是流式细胞仪的检测发现全酵母疫苗并不能促使小鼠产生细胞免疫。近些年的研究表明酵母菌株被巨噬细胞所吞噬后,酵母菌株中的m RNA会释放到巨噬细胞中并在巨噬细胞中进行翻译表达。本研究中根据Sun Young Sunwoo的研究构建了CoⅠ-P72s-α凝集素/IRES-P72s质粒并进行电转至X33-PDI工程酵母菌株中。进行酵母基因组PCR验证菌株构建状况并且对通过验证的菌株进行甲醇诱导确定目的基因可以正常表达。酵母菌株在YPM培养基中加甲醇诱导3天后制作成冻干粉,将冻干粉分装保证每管中含有1.5×10~9个酵母。对BALB/c小鼠进行隔一周灌胃一周的实验,持续3个月。检测小鼠的体液免疫和细胞免疫结果。
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