论文部分内容阅读
幽门螺杆菌(HP)是一种人群感染率已高达50%以上的常见致病菌,是慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因子,也是形成胃腺癌、胃MALT淋巴瘤的主要危险因素。目前,临床主要采取含抗生素的三联或四联药物治疗HP感染,但由于药物的副作用以及耐药性等多种问题的存在,根除治疗的失败率仍较高。近年来,随着微生态学的发展,有人开始尝试通过微生态疗法达到控制细菌感染的目的,并已经成为研究的热点。嗜酸乳杆菌是人类胃肠道内主要的益生菌,有研究表明,嗜酸乳杆菌属的某些菌株对HP具有拮抗作用,但其作用机制尚不清楚,因此,如何开发和利用嗜酸乳杆菌并对其作用机制进行深入的探讨无疑具有重要的临床意义。本实验室已通过体内外实验筛选到对HP国际标准菌株具有明显拮抗作用的两株(L4和L6)嗜酸乳杆菌菌株,本研究就抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对不同慢性胃病来源HP临床分离株的抑制作用做了进一步的研究并对其可能的作用机制进行了深入探讨,同时通过在HP感染C57BL/6小鼠体内应用,进一步对该株抗HP嗜酸乳杆菌(L6)预防和治疗HP感染的实用价值进行评价。主要研究结果如下:1、抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对不同慢性胃病来源HP临床分离株的体外抑制效应。将抗HP嗜酸乳杆菌(L6)与不同慢性胃病来源HP临床分离株进行混合培养后,对HP的菌落计数及尿素酶活性进行检测,结果表明,本实验室建立的抗HP嗜酸乳杆菌(L6)在液体培养条件下对不同慢性胃病来源HP临床分离株的生长具有抑制效应,对HP尿素酶活性具有明显的抑制作用;抗HP嗜酸乳杆菌(L6)上清液在固体培养条件下对不同慢性胃病来源的HP临床分离株的生长同样显示出抑制效应。2、抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对不同慢性胃病来源HP与SGC-7901细胞黏附的抑制效应及其对IL-8产生的拮抗作用分析。通过形态学检查分析抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对SGC-7901细胞的黏附指数及经抗HP嗜酸乳杆菌拮抗后不同慢性胃病来源HP黏附指数的变化以及通过ELISA方法观察SGC-7901在不同条件下的IL-8产生能力,证实抗HP嗜酸乳杆菌(L6)与胃粘膜上皮细胞具有黏附性,且黏附后并不影响胃粘膜上皮细胞的存活率;抗HP嗜酸乳杆菌可通过占位效应对不同慢性胃病来源HP与胃粘膜上皮细胞的黏附发挥拮抗作用;抗HP嗜酸乳杆菌可通过拮抗HP诱导胃粘膜上皮细胞分泌IL-8进而抑制炎症反应。3、抗HP嗜酸乳杆菌预防及长期治疗C57BL/6小鼠HP感染的实验研究。采用先灌饲抗HP嗜酸乳杆菌再灌饲HP菌株,或于灌饲HP菌株后再灌饲抗HP嗜酸乳杆菌的方法,并观察小鼠胃粘膜组织的尿素酶活性、HP定植情况及中性粒细胞淋巴细胞浸润程度和组织中HP分离培养结果,评价抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对HP感染的预防及治疗作用。结果表明,预防性接种抗HP嗜酸乳杆菌(L6)可以明显降低C57BL/6小鼠的HP感染率,并减轻HP感染导致的胃粘膜损伤;HP感染后,再灌饲抗HP嗜酸乳杆菌(L6)也可取得明显疗效,并可以明显降低胃粘膜组织HP定值密度,减轻胃粘膜病理损伤及降低血中HP-IgG抗体水平,但需进行长期治疗,而且长期应用抗HP嗜酸乳杆菌(L6)还可明显降低C57BL/6小鼠的HP再感染率。总之,本研究探讨了本实验室筛选后建立的抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对不同慢性胃病来源HP临床分离株的抑制效应及其可能的作用机制,评价了该株抗HP嗜酸乳杆菌(L6)对C57BL/6小鼠HP感染的预防及治疗价值,为该株抗HP嗜酸乳杆菌(L6)在临床的开发和利用提供了可靠的依据。