不同培养因素对犬IVM卵母细胞形态和发育能力的影响

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本试验采用组织学、组织化学、电子显微镜及细胞培养技术,在观察体内犬卵母细胞发育形态学特点的基础上,进行体外犬卵母细胞发育形态学的比较性研究,探讨促黄体素、培养温度、pH值等对犬卵母细胞的体外成熟的影响,结果如下:1、无卵泡和黄体的犬卵巢呈长卵圆形或蚕豆状,生殖上皮为立方上皮,原始卵泡单个或三五成群,次级卵泡未见典型的放射冠,三级卵泡可见明显卵丘形成;透明带出现于初级卵泡的后期。2、未培养的卵母细胞,脂质分布均匀、密集,着色较深,随成熟培养卵母细胞内脂滴稀松,着色变浅;卵母细胞脂滴直径随培养时间先增后小,在培养48h时达高峰。3、体外成熟培养液中适量添加FSH、LH、E2能显著提高犬卵母细胞的成熟率,不同季节、温度、PH值对卵母细胞的成熟率均有明显影响。4、体外成熟犬卵母细胞在各个发育阶段均有线粒体、脂滴、空泡存在,体外成熟24h细胞内线粒体多以帽状为主,72h时呈棒状,而高尔基体和内质网随培养时间的延长出现退化现象。本研究结果将为建立和完善犬卵母细胞体外成熟的培养体系,提供形态学理论依据和确实可靠的试验依。
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