川木瓜黄酮降糖复配物制备及对小鼠糖脂代谢影响

来源 :哈尔滨工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxiaojuan
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由于各种不良生活习惯使胰腺病变导致胰岛素功能障碍,Ⅱ型糖尿病发病率逐年增高。当人体超负荷摄入糖类化合物时,胰岛素不足以进行分解,多余能量在胰岛素靶器官储存引发慢性炎症和胰岛素抵抗,长此以往发展成Ⅱ型糖尿病。源自天然产物的生物活性成分调节血糖具有多靶点、资源丰富、成本低、疗效好,且低毒无明显副作用特点,对于糖尿病防治一直是研究热点。本研究优化川木瓜黄酮提取纯化工艺,研制出口感好且具有降糖降脂功能的复配物,通过建立高脂饲料联合STZ诱导Ⅱ型糖尿病模型,研究其对Ⅱ型糖尿病小鼠体内糖脂代谢的影响,初步探究其作用机制。采用超声辅助提取法提取川木瓜黄酮,通过PB实验筛选主要影响因素,进行响应面实验优化设计,确定最优提取条件为:提取时间50 min,超声功率400 W,温度62℃,料液比1:27,乙醇浓度51%,对最优条件验证:黄酮得率为3.29%±0.28%。对树脂静态吸附和动态吸附性能研究筛选出最优树脂HPD826,得到最优纯化参数为径长比1:20,上样浓度1.4 mg/m L,上样量30 m L,洗脱剂70%乙醇,洗脱流速1.5 BV/h,川木瓜黄酮纯度为26.8%±1.2%。经硅胶柱进一步纯化,纯化后经LC-MS/MS二级质谱鉴定分析,川木瓜黄酮主要包含以下四种黄酮类化合物:根皮素、槲皮素、二甲氧基-三羟基黄酮和金丝桃苷。以柱层析制备得到的川木瓜黄酮(纯度为39.3%±2.4%)和天然植物原料组分复配,结合电子舌和感官评价筛选出口感最佳配方。复配物对α-葡萄糖苷酶抑制活性较强,以Hep G2/IR为模型,研究结果表明川木瓜黄酮降糖复配物一定程度提高细胞存活率,同时增加葡萄糖消耗量而改善胰岛素抵抗。复配物抗氧化效果较好,对超氧自由基IC50为10.9 mg/m L,对·OH的IC50为1.8 mg/m L,对ABTS自由基IC50为594.1μg/m L。体外进一步研究了复配物的粉体特征和水溶液特性,结果显示复配物粒径较小,稳定性好易储存;水溶液中颗粒均匀、粒径小易溶解,黏度小,具有很好冲调稳定性。建立高脂联合STZ诱导的Ⅱ型糖尿病模型,研究川木瓜黄酮降糖复配物对Ⅱ型糖尿病小鼠体内糖脂代谢的影响,具有降低空腹血糖、口服糖耐量和胰岛素含量,降低肝糖原含量;升高血清SOD和GSH-Px活性,降低MDA含量;降低TC、TG、LDL-C含量,升高HDL-C含量,减少瘦素含量,增加脂联素含量,通过调节脂类分解代谢水平而影响小鼠体内血糖水平;降低脏器指数修复炎性肿大、降低炎性因子TNF-α和IL-6水平和组织形态学观察表明复配物改善了肝和胰腺细胞结构紊乱,大小不均和间隙增大。发现复配物可以通过激活胰岛素PI3K/AKT通路,从而上调脂代谢相关通路蛋白AMPK和糖原合成酶上游蛋白GSK3β表达,最终抑制了SREBP-1表达进而抑制FAS表达。川木瓜黄酮降糖复配物能够改善高脂联合STZ诱导的Ⅱ型糖尿病糖脂代谢。对探究天然产物在定向调节Ⅱ型糖尿病中的应用及促进川木瓜的精深加工,具有十分重要的理论指导和实际意义。
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