虾蟹是我国重要的经济水生甲壳动物，也是出口创汇的重要水产养殖品种。伴随着水产养殖业快速发展的同时，病害造成的经济损失也越来越大，其中颤抖病是中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）最严重的流行病之一。2002年王文等首次在水生动物体内发现致病性螺原体，2004年根据“科霍法则”确定其为中华绒螯蟹颤抖病的病原体，随后又发现该螺原体还可导致南美白对虾(Penaeus vannamei)、克氏原螯虾(Procambarus clarkia)的大规模死亡，2010年正式将其命名为中华绒螯蟹螺原体（Spiroplasma eriocheiris）。对于这一新型病原微生物的生物学特性、致病机制、防治方法等诸多方面急需深入系统研究。本论文应用免疫学技术、分子生物学技术、噬菌体展示肽库筛选技术等针对中华绒螯蟹螺原体开展研究，并获得以下主要结果:　　1、抗中华绒螯蟹螺原体系列单抗及多抗的制备及鉴定　　分别用中华绒螯蟹螺原体（S.eriocheiris）菌悬液及全菌体蛋白免疫Balb/c小鼠，按常规方法融合，得到20株稳定分泌抗S.eriocheiris抗体的杂交瘤细胞株，从中挑选4株连同本实验室前期制备的2株杂交瘤细胞，制备、纯化单克隆抗体，并进行免疫球蛋白类型、亲和力、滴度以及特异性的鉴定。结果发现，单抗5C11、5D9、6F5、12H5重链均为IgG1，轻链均为κ，单抗6H7、7C8重链为IgG2a，轻链为κ;6H7亲和力最高，5D9最低;ELISA，Westernblot检测表明，7C8和6H7为S.eriocheiris特异性单抗，其余4株单抗与S.eriocheiris发生结合，同时与S.mirum、S.melliferum出现交叉反应;6株单抗均与江苏省八个不同地区分离的S.eriocheiris菌株结合。多克隆抗体与S.eriocheiris结合，同时与S.mirum、Smelliferum以及解尿脲原体（U.urealyticum）出现交叉反应。　　2、中华绒螯蟹螺原体特定功能蛋白模拟表位的筛选及鉴定　　通过制动、变形等试验发现，单抗6F5、7C8、12H5使S.eriocheiris形态发生明显改变，多数螺旋结构消失，光镜下呈散点状;单抗5D9及混合单抗使S.eriocheiris运动性部分丧失，光镜下见其运动较呆板，在液面呈漂浮状。在此基础上，首先以S.eriocheiris特异性单抗6H7为靶分子筛选噬菌体展示十二肽库，获得一致性插入序列:FQGINHYNQMER，通过生物信息学分析，发现该序列与S.eriocheiris的类粘附蛋白(ALP)具有一定的同源性;Westernblot结果表明单抗6H7能够与ALP结合;ELISA结果显示，展示该序列的噬菌体肽能够与6H7特异性结合，并且呈现剂量依赖性，S.eriocheiris能够竞争抑制这种结合;免疫电镜发现单克隆抗体6H7能够与S.eriocheiris菌体表面结合。随后采用相同的筛选策略，以能够使S.eriocheiris发生形态改变的6F5，7C8，12H5三种单抗混合物作为靶分子进行肽库的筛选，获得9种不同的氨基酸序列，通过生物信息学分析，发现噬菌体克隆NM4.32和NM4.38的共有序列YMRDMQSGLPRY与S.eriocheiris及S.mirum的细胞形状决定蛋白(MreB)具有很高的同源性;噬菌体克隆NM4.39的序列与非凡螺原体细胞分裂蛋白(FtsZ)有一定程度的同源性。　　3、中华绒螯蟹螺原体快速检测方法的研究　　应用所制备的单克隆抗体及多克隆抗体建立了双抗夹心ELISA检测方法。该方法对Seriocheiris的最低检出量约为0.1μg/mL;与健康中华绒螯蟹血淋巴及自然环境中一些常见细菌（大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌）无交叉反应。此外，还对胶体金免疫层析检测方法进行了初步探讨:制各并纯化了金标抗体;鉴定了金标抗体与S.eriocheiris以及与抗鼠二抗的反应性，并初步组装了试纸条，为建立成熟、完善的胶体金免疫层析检测方法提供了实验基础。