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Foxl2是叉头转录因子家族中的一员,它在哺乳动物的卵巢发育和维持中起着重要的作用。然而,foxl2在鱼类中的作用机制研究甚少。本文旨在以斑马鱼为模式生物,研究foxl2a及其旁系同源基因foxl2b在卵巢发育中的表达模式及生物学功能。 在本研究中,我们克隆了斑马鱼foxl2a的两种转录本(foxl2a-1和foxl2a-2)和foxl2b的一种转录本,并进行了分子特征、表达模式和功能机制的分析。 foxl2a和foxl2b具有高度保守的forkhead结构域,其在进化分支上同属folx2家族,共线性分析揭示它们所位于的15号和2号染色体上的基因在进化的过程中存在着补偿性丢失/保留的机制,这意味着它们在基因组复制之后经历了趋异进化的过程。 foxl2a和foxl2b在成年斑马鱼的性腺中呈性别二态性的表达模式,主要表达于卵巢,在卵巢发育过程中,它们以有序且相异的表达模式表达于卵巢的滤泡层细胞。 为了揭示foxl2a和foxl2b在性腺发育中的作用,我们利用TALEN技术建立了分别敲除foxl2a(foxl2a-/-)和foxl2b(foxl2b-/-)的单突变系及同时敲除这两个基因的双突变系(foxl2a-/-/foxl2b-/-)。通过对野生型和突变体进行形态学、组织学、转录组和差异基因表达的分析,我们发现在foxl2a-/-雌性单突变体的卵巢中,sox9a-amh/cyp19a1a信号通路和凋亡相关基因被激活,触发了卵母细胞的凋亡和退化,从而导致foxl2a-/-雌性突变体在180dpf后出现卵巢早衰(POF)现象;在foxl2b-/-雌性单突变体的卵巢中,一些与精巢分化和雄激素生成相关的基因如dmrt1、sox9a、amh、wt1a、gata4、nr5a2、nr5a5、nr5a1b、cyp17a、cyp11a2等都显著上调,导致foxl2b-/-雌性突变体在180dpf后出现不完全性逆转现象;在同时敲除foxl2a和foxl2b的双突变体中,与精巢发育相关基因皆剧烈上调,导致foxl2a-/-/foxl2b-/-雌性突变体在卵巢发育早期便发生了完全性逆转的现象,至150dpf时,所有双突变体均发育为可育的雄性。foxl2a和foxl2b在功能上存在着补偿和冗余的现象,它们通过不同的分子机制协同调控斑马鱼的卵巢发育和维持。另外,我们还对三种突变体的精巢进行了分析,发现斑马鱼精巢的发育不受foxl2a和foxl2b的调控。