DNA链间交联(ICL,interstrand crosslinks)是一种非常严重的DNA损伤,其阻断了DNA复制和转录。近年来出现了通过抑制细胞周期检验点及DNA损伤修复相关蛋白的活性,并联合使用化疗药物的方法,来治疗癌症。HELQ是参与ICL修复的一个DNA解旋酶,其修复途径与FA信号通路平行。因此,本研究将为癌症治疗提供更多的选择性和理论指导。HELQ突变小鼠生育力低下,睾丸和卵巢萎缩,部分管腔仅存有支持细胞,卵巢及垂体极易成瘤。我们前期研究发现DNA解旋酶HELQ功能缺失导致小鼠胚胎干细胞分化得到小鼠原始生殖细胞(m PGCLCs)的效率显著性降低,然而并不影响小鼠胚胎干细胞多能性的维持,Helq-/-m ES能够通过四倍体补偿实验,由其分化得到的Epi LC与野生型的也并无明显差异。本文以DNA解旋酶HELQ是如何影响m PGCLCs分化为切入点,经统计发现,在体外分化形成PGCLC的过程中,野生型和Helq-/-m ES在分化的第二天及第四天PGCLC球的细胞数量并无明显差异,但分化第六天Helq-/-PGCLCs细胞数目却明显野生型少,说明HELQ的确影响生殖细胞的维持。由此利用Hela及人类胚胎干细胞进一步分析HELQ在其他细胞系中是否具有同样的功能。首先利用CRISPRCas9技术获得HELQ突变的细胞系,加药处理后分析其凋亡比例及细胞周期发现,Helq-/-Hela细胞系在MMC处理后发生严重的G2/M期阻滞,撤药后24h细胞凋亡比例比野生型显著增高。而HELQ-/-人类胚胎干细胞系(h ES)在加药处理后细胞周期及细胞凋亡比例与野生型相比无明显差异,并且通过real-time q PCR检测干细胞多能性marker表达发现二者也并不存在明显差异。综上可知,DNA解旋酶HELQ主要是通过参与细胞周期及细胞凋亡调控影响细胞的存活,并且对于不同的细胞系的影响不同,这可能与它的组织特异性表达有关。