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肝癌是我国高发性恶性肿瘤，分布广、转移率高，但其发生的分子机制尚不明确，从信号传导途径治疗肝癌已发展为目前生物治疗的新兴领域。细胞因子通过与其它细胞的特异性受体结合，激活—系利的信号传导分子来完成其信号传导的使命，并因此而构成了一个复杂的细胞因子网络，调节机体的免疫并与多种疾病的发生和愈后有密切关系。白介素6(IL-6)是一种具有广泛免疫调节作用的细胞因子，主要介导两种胞内信号转导途径即Ras-MAPK(丝裂原激活的蛋白激酶)级联反应途径和Jak-STAT(信号转导和转录激活因子)途径。信号转导和转录激活因子STAT(signal transducer and activator of transcription)是一族DNA结合蛋白，与酪氨酸磷酸化信号通路偶联，发挥转录调控作用，从而介导多种生物学效应。 腺病毒载体(Adenoviral vector)是目前重要的基因转移载体之一。作为真核基因表达载体，腺病毒载体可装载长达7.5kb的外源DNA，复制效率高，并且不和宿主染色体整合，因而比较安全。在癌症的基因治疗方面，Ad载体可运载肿瘤抑制基因到达患处，取得较好的治疗效果。腺病毒载体的这些优点使它在基因治疗研究和临床试验中备受青睐，显示出极强的生命力。 本文选择信号转导及转录活化因子STAT3作为研究对象，研究了它在人白细胞介素6(Human Interleukin-6,hIL-6)的刺激下，对肝癌细胞BEL-7402增殖和迁移的作用，试图在细胞水平寻找治疗肝癌的方法。 1 构建了编码Stat3基因和优势负性突变(dominant negative)Stat3基因的重组腺病毒载体Ad1.Stat3和Ad1.Stat3CYF，通过Western blot方法确认了它们在肝癌细胞中能够正确表达并具有活性。dominant negative STAT3可抑制野生型STAT3的磷酸化作用，并与野生型STAT3结合，形成无活性的二聚体，使STAT3大量聚集于核，无法进入核内与DNA结合而发挥功能。 2 用Wound assay和MTT法研究细胞的迁移和增殖，发现过表达STAT3可抑制肝癌细胞BEL-7402的迁移，dominant negative STAT3的表达对这种抑制作用有所恢复。STAT3对肝癌细胞BEL-7402的增殖能力没有影响。 3 IL-6促进制肝癌细胞BEL-7402的迁移，但在IL-6刺激下过表达STAT3却抑制肝癌细胞BEL-7402的迁移，推断STAT3并非介导了IL-6对肝癌细胞 硕士学位论文 第一部分 摘 要BEL－7402迁移的促进作用，而可能通过其它信号转导途径来介导，肝癌细胞BEL－7402最终迁移率的高低与两条通路的平衡作用有关。IL．6对肝癌细胞BEL－7402的增殖能力没有影响。