研究背景阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是发生在老年期及老年前期的一种以进行性认知功能障碍、生活能力下降及精神行为异常为主要临床特征的中枢神经退行性脑病，是导致老年痴呆最为常见的病因。既往研究认为，可溶性β-淀粉样蛋白（amyloid-beta protein，Aβ）在大脑皮层和海马等区域广泛聚集及其神经毒性作用可导致进行性认知功能障碍等临床特征，是AD发生和发展的重要病理学基础。因此，阻止和（或）减少Aβ聚集和老年斑形成成为防治AD的关键靶点之一。有研究显示，载脂蛋白E（apolipoprotein E，ApoE）是Aβ沉积、纤维化病理过程中的关键性“伴侣分子”，其羧基端200²99区域可直接与可溶性Aβ中的12²8片段结合形成难以溶解的ApoE/Aβ复合物，从而加速Aβ沉积、纤维化。我们近期的体外实验表明，Aβ_20-29短肽可以竞争性地与ApoE结合，阻止ApoE与Aβ形成复合物，有效减少ApoE对Aβ聚集的促进作用以及Aβ的细胞毒性作用。然而，Aβ_20-29短肽能否有效改善AD认知功能障碍以及减少脑内病理损害，目前尚不清楚。本项研究将应用幼年转人β-淀粉样前体蛋白/早老素-1（APPswe/PS1dE9）基因AD小鼠，通过行为学评定、酶联免疫吸附和免疫印迹法等多种实验技术方法，探讨Aβ_20-29短肽在改善APPswe/PS1dE9转基因小鼠学习记忆功能障碍，阻止或减少Aβ纤维化及其神经毒性作用等方面的效应作用和机制，为研发防治AD新药物提供理论基础和实验依据。实验方法选取健康雌性幼年（16W）APPswe/PS1dE9转基因小鼠，随机分为Aβ_20-29治疗组和生理盐水对照组。应用行为学实验评定Aβ_20-29治疗组和生理盐水对照组小鼠的空间学习记忆功能；应用ELISA法测定各组小鼠脑内Aβ_1-40、Aβ_1-42的表达水平；应用免疫印迹法（Western Blot）测定各组小鼠脑内ApoE、淀粉样前体蛋白（APP）及炎性反应的变化情况。实验结果（1）Morris水迷宫评定结果显示：Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠的潜伏期较对照组小鼠显著减少（F（1,14）=12.75, P <0.01），Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠在目标象限的停留时间（P<0.01）和路程（P<0.05）显著高于对照组小鼠，提示Aβ_20-29治疗能有效改善APPswe/PS1dE9转基因小鼠的空间学习和记忆功能障碍。（2）ELISA实验结果显示：Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内可溶性（P<0.01）和不溶性（P<0.05）Aβ_1-42含量较对照组小鼠显著减少，且Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9小鼠脑内可溶性（P<0.01）和不溶性（P<0.01）Aβ_1-40含量较对照组小鼠显著降低，提示Aβ_20-29治疗能有效减少APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内Aβ_1-42、Aβ_1-40含量。（3）Western Blot实验结果显示：Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内APP含量较对照组小鼠显著减低（P<0.01），提示Aβ_20-29治疗能有效减少APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内APP含量；Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内ApoE含量较对照组小鼠显著减低（P<0.01），提示Aβ_20-29治疗能有效减少APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内ApoE含量；Aβ_20-29治疗组APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内GFAP（P<0.05）、Iba-1（P<0.01）含量较对照组小鼠显著减低，提示Aβ_20-29治疗能有效抑制APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内的炎症反应过程。结论（1）Aβ_20-29治疗能显著改善APPswe/PS1dE9转基因小鼠的空间学习和记忆功能障碍。（2）Aβ_20-29治疗能显著降低APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内APP以及可溶性和不溶性Aβ_1-40、Aβ_1-42的水平。（3）Aβ_20-29治疗能有效减少APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内ApoE含量。（4）Aβ_20-29治疗能显著减少APPswe/PS1dE9转基因小鼠脑内星形胶质细胞、小胶质细胞的炎性反应。上述研究结果表明：人工合成的Aβ_20-29短肽能够通过降低脑内APP含量减少Aβ的产生；通过减少脑内ApoE含量并竞争性地与之结合，有效阻断ApoE对Aβ_1-40、Aβ_1-42纤维化的促进作用；通过降低星形胶质细胞、小胶质细胞的炎性反应，有效抑制Aβ所致神经毒性作用，进而显著改善转基因AD小鼠的认知功能障碍。提示人工合成的Aβ_20-29短肽对于AD具有明确的防治作用。