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微流控芯片毛细管电泳(Microchip-based Capillary Electrophoresis, μCE)是近年来发展的新型分析技术,是微全分析系统的一个重要研究领域。μCE具有操作简单,分离效率高,分析速度极快,样品试剂消耗极少,易于集成化、微型化、自动化等优点。激光诱导荧光(Laser Induced Fluorescence, LIF)是目前最灵敏的检测技术之一,具有灵敏度高、选择性高、专属性强、响应速度快等优点,是μCE最先采用而且现在仍然是最常用的检测技术。目前,微流控芯片研究的热点正逐步转向构建各种不同类型的芯片实验室,从化学、生物到信息、光学等,特别是以细胞生物学的系统研究为基本目标的微流控芯片细胞实验室更加引起研究者的关注。本文采用μCE-LIF对细胞中的组分进行分离检测,主要内容有以下四章:一、概述了微流控芯片与微流控芯片电泳(μCE)的进展情况,对μCE在细胞分析中的应用研究(包括群体细胞与单细胞两部分)的进展进行了综述。二、建立了同时测定细胞凋亡信号和ROS的μCE-LIF分析方法,对标记染色条件和细胞溶膜条件进行系统地考察,1min内完成活性氧和细胞凋亡信号的同时测定。细胞内活性氧和DHR123的反应产物(Rh123)在0.1~2μmol/L浓度范围内线性关系良好,相关系数r2=0.992,检出限为0.058μmol/L,可用于细胞内活性氧的定量。将此方法用于检测活性氧和细胞凋亡关系,结果表明阿霉素诱导的凋亡HepG2肝癌细胞活性氧含量升高。该方法简单、灵敏、准确、重现性好,为同批细胞的凋亡信号和ROS的检测提供了一种新的方法。三、运用微芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测方法(μCE-LIF)分析了白屈菜红碱(CHE)、血根碱(SAN)对HepG2肝癌细胞的抗肿瘤活性,为研究白屈菜红碱、血根碱的抗肿瘤性能提供参考。本实验先用不同浓度的白屈菜红碱(CHE)、血根碱(SAN)分别刺激体外的肝癌HepG2细胞,用倒置显微镜观察CHE、SAN作用后的HepG2肝癌细胞形态的变化以及用MTT法检测HepG2肝癌细胞的生长受抑制情况,然后利用芯片电泳检测HepG2肝癌细胞在CHE、SAN作用前后细胞内ROS含量的变化。结果表明,随着作用时间延长、药物浓度不断提高,两者对细胞的抑制作用明显增强;HepG2细胞受到CHE、SAN刺激后ROS的含量增加。四、介绍了采用芯片电泳(μCE-LIF)单细胞分析法检测单个阿霉素诱导的人肝癌HepG2耐药细胞内阿霉素的代谢情况。本章首先采用间歇给药浓度递增诱导法建立人肝癌细胞HepG2耐药株(HepG2/ADR),然后对其中一个给药浓度(1.0μg/mL)所建立的耐药(HepG2/ADR)细胞株中的单个耐药细胞内阿霉素的代谢情况进行微芯片电泳检测,并对耐药细胞株培养过程中出现的问题作出总结,为探讨阿霉素耐药性机制和寻求逆转耐药性药物研究奠定基础。