【摘 要】
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鱼类神经坏死病毒(viral nervous necrosis)分类上属于诺达病毒科(Nodaviridae)β诺达病毒属(Betanodaviruses),是多种养殖鱼类的重要病原.该文从患病毒性神经坏死病的斜带石
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鱼类神经坏死病毒(viral nervous necrosis)分类上属于诺达病毒科(Nodaviridae)β诺达病毒属(Betanodaviruses),是多种养殖鱼类的重要病原.该文从患病毒性神经坏死病的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)脑和眼中制备病毒液,感染SSN-1细胞系,用感染了病毒的细胞提取总RNA做模板.并根据GenBank数据库公布的同源序列设计了7对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出目的片断,将PCR产物测序和分析.斜带石斑鱼神经坏死病毒(orange-spotted nervous necrosis virus,OGNNV)基因组由两个片断(RNA1和RNA2)组成,RNA1由3103个核苷酸组成,含有一个开放阅读框(ORF),编码982个氨基酸RNA2由1433个核苷酸组成,含有一个ORF,编码338个氨基酸.OGNNV基因组与新加坡GGNNV(greasy grouper NNV)的基因组有高度的相似性.根据OGNNV的RNA2的ORF核苷酸序列,设计了一对特异性引物,采用RT-PCR扩增了OGNNV的主衣壳蛋白(MCP)基因.将分别经柱层析和SDS-PAGE纯化的融合蛋白作抗原,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体.将受OGNNV感染濒死鱼的脑和视网膜组织进行H&E染色后观察,发现脑组织和视网膜神经细胞坏死、细胞空泡化.地高辛核酸探针进行原位杂交,发现脑组织各个部分和视网膜神经细胞层可被标记.
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