第一部分:MDS恶性转化中UVRAG基因的作用机制的研究目的:骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndromes,MDS)是起源于骨髓造血干细胞的异质性克隆性疾病。这类病人表现为骨髓细胞形态异常,一系或多系细胞减少,并且具有高危演变为急性髓系白血病的风险。自噬相关基因UVRAG参与细胞的自噬过程,本课题组前期研究发现随着MDS由低危转向高危,UVRAG表达逐渐降低,与MDS恶性进展负相关,本实验拟研究自噬相关基因UVRAG在MDS恶性转化中的作用机制。方法:1、用靶向UVRAG特异性干扰RNA(siRNA-UVRAG)转染MDS转白血病细胞株SKM-1。2、应用 qRT-PCR 方法检测 siRNA-UVRAG 干扰前后 UVRAG、Bcl-2、LC3、Beclin-1的表达水平。3、采用CCK-8方法检测siRNA-UVRAG干扰前后SKM-1细胞的增殖情况。4、采用Annexin V-FITC/PI双染后流式细胞仪检测SKM-1细胞凋亡。结果:在UVRAG下调的同时,细胞自噬特征性的标记基因LC3、Beclin-1的表达也出现了下调的趋势,自噬减弱;siRNA-UVRAG组的细胞增殖率比对照组高;siRNA-UVRAG干扰组的细胞凋亡率较对照组降低。结论:1、UVRAG对细胞自噬起正性调节作用,与LC3、Beclin-1协同调节。2、在MDS恶性转化中,UVRAG可能是通过促进细胞自噬和凋亡而发挥作用。第二部分:MDS相关基因突变对移植预后的影响目的:近年来,越来越多的研究显示MDS相关基因突变与移植预后有明显关联,本研究分析统计骨髓增生异常综合征(MDS)患者中常见的基因突变,并探讨其对MDS患者造血干细胞移植后总生存期的影响。方法:选择2013年10月至2018年8月在苏州大学附属第一医院诊断MDS并进行移植的68名患者,采用二代基因测序检测这些患者在移植前初诊的骨髓样本的基因突变情况,用统计学方法分析不同基因突变对移植预后的影响。结果:NRAS、TP53、GATA2三个基因突变都与造血干细胞移植后总生存时间OS(overall survival)相关,这些基因突变患者的总体生存时间都要比该基因野生型患者的生存时间短,且差异有明显统计学意义。结论:1.有NRAS、TP53、GATA2基因突变会导致患者移植后总生存期缩短,预后较差。2.NRAS、TP53、GATA2基因突变是MDS患者移植后独立的预后因素,是否有这些基因突变可作为评估MDS移植患者预后的重要指标。