【摘 要】
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目的:探讨芹黄素对大鼠肝细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）模型的损伤及AKT/e NOS通路的影响。方法:将BRL3A细胞分为3组,分别为控制组、H/R组、H/R+芹黄素组,H/R+芹黄素组加入芹黄素预处理,然后H/R组以及H/R+芹黄素组进行H/R处理。通过CCK-8检测细胞活性,用流式细胞术检测细胞凋亡,用ELISA法检测TNF-α、IL-1β水平,同时检测S
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目的:探讨芹黄素对大鼠肝细胞缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）模型的损伤及AKT/e NOS通路的影响。方法:将BRL3A细胞分为3组,分别为控制组、H/R组、H/R+芹黄素组,H/R+芹黄素组加入芹黄素预处理,然后H/R组以及H/R+芹黄素组进行H/R处理。通过CCK-8检测细胞活性,用流式细胞术检测细胞凋亡,用ELISA法检测TNF-α、IL-1β水平,同时检测SOD、MDA水平,用Western blot法检测肝细胞Akt,p-Akt,e NOS,p-e NOS,bcl-2蛋白的表达。结果:1、细胞活力显示:与控制组相比,H/R组BRL 3A细胞低氧4h,复氧24h、48h和72h,随着复氧时间点的增加,H/R组细胞活力逐渐降低;与H/R组对比,复氧48h和72h时,给予药物芹黄素处理的细胞活性明显升高;2、细胞凋亡显示:与对照组对比,随着复氧时间点的递增,细胞凋亡率明显增加;与缺氧/复氧组比较,给予药物芹黄素处理后,不同复氧组的细胞凋亡率明显降低;与对照组相比,缺氧/复氧组中bcl-2的表达显著降低;与缺氧/复氧组比较,给予芹黄素处理后bcl-2表达显著增加;3、炎性反应及氧化应激显示:与对照组相比,缺氧/复氧组中TNF-α、IL-1β与MDA水平显著升高,细胞上清液SOD显著下降;与缺氧/复氧组比较,给予芹黄素处理后细胞上清液TNF-α与IL-1β水平显著降低,而细胞上清液SOD的水平显著升高;4、AKT、eNOS的表达:与对照组相比,缺氧/复氧组中p-Akt、p-e NOS（Thr495）,p-Akt/Akt、p-e NOS/e NOS比值显著降低;与缺氧/复氧组比较,给予芹黄素处理后p-Akt、p-e NOS（Thr495）表达显著增加,p-Akt/Akt、p-e NOS/e NOS比值显著升高。结论:1.芹黄素能够减缓H/R处理的大鼠肝细胞损伤。2.芹黄素能改善大鼠肝细胞氧化应激和炎性反应并可能与激活Akt/e NOS通路有关。
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