番茄快繁及遗传转化体系的优化研究

被引量 : 4次 | 上传用户:daocaoren666666
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本试验以“中蔬四号”番茄为材料,通过组织培养进一步优化不定芽的再生体系并建立高效的番茄快繁体系。采用携带双元表达载体pCAMBIA3301(含GUS基因和Bar基因)的农杆菌EHA105侵染番茄子叶,得到了转基因植株,为以后采用基因工程技术改良番茄性状奠定了基础。具体研究结果如下:1、以“中蔬四号”番茄为试验材料,通过对影响番茄子叶离体再生的相关因素进行研究,获得番茄离体再生的优化方案。幼苗获得的最佳方法是种子16h先用冷水浸泡,播种后暗培养约3 d至发芽,再转至光条件下培养,8-9 d即可获得无菌苗;另外通过胚也可以获得无菌苗,培养时间5 d,比种子缩短2 d,且幼苗与前者相似;对激素ZT和IAA进行过滤灭菌的效果优于高压灭菌;不同有机添加物对番茄子叶芽分化效果由高到低顺序为:N&N>DL>MES>MS;子叶中间段为诱导番茄不定芽的最佳外植体部位,旦背面向上放置于培养基上更有利于不定芽的诱导;在试剂方面,玉米素核苷(Zeatin Riboside购自Phyto Technology Laboratories-Z899)的效果优于玉米素(购自上海生物工程有限责任公司-ZB0747);最佳增殖培养基配方是MS+NAA 0.01 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。2、为建立一套高效实用的快繁体系,从成苗时间、成苗数量、成苗成本三方面进行了研究,统计分析显示,由种子生长为无菌苗需要5 d;取子叶诱导愈伤和不定芽需要25 d;不定芽伸长需要10 d;伸长的芽经过7 d就可以生根;组培室炼苗3 d后蛭石中,生长3-7 d后移栽。从种子往移栽到大棚需要56 d,有效缩短了组织培养的周期;一块愈伤可诱导长出7株组培苗;一粒种子长成苗的成本约0.35-0.4元。3、对最佳选择剂PPT的浓度进行了筛选,诱导不定芽的PPT最适浓度为0.8 mg/L,生根PPT最适浓度为0.5 mg/L;绘制了菌株的生长曲线,二次活化的菌液振荡培养8 h进入对数生长期,10 h后进入稳定生长期,培养时间在8h~10h间的菌株活性高,利于侵染;采用农杆菌介导法获得了转基因植株,通过抗性植株的PCR检测,确定目的基因已整合到番茄基因组中,这为今后番茄的遗传转化奠定基础。
其他文献
总结王庆国教授治疗活动期溃疡性结肠炎的临床诊治经验。他依据腹泻、黏液脓血便、腹痛等活动期的具体病变特点,认为本病病因以湿热之邪、脾肾虚损、情志失调等因素多见,治疗
在研发的太阳能制冷系统前期的基础上,针对所需不同类型的蓄冷介质的优缺点进行分析比较,选择相变材料作为太阳能制冷系统的蓄冷介质。根据蓄冷要求,对两种新型微胶囊相变蓄
信息技术发展的同时,组织管理者对数据的依赖性也逐渐增强。数据仓库以数据库为基础、以提供决策分析所需的数据环境为核心任务,同时也推动着数据清洗技术的应用。结合数据仓
任何企业和地区的超常规发展都是银行支持的后果,任何一个经济实体的舅起,都有银行资金的影子,但如果我们不能建立有效的问责机制,银行还能走多远?
改革开放以来,随着户籍管理的放开,我国的迁移人口的数量呈现出逐渐增加的态势,进入21世纪以来,人口迁移在我国已经成为一个越来越普遍的现象。按照现代经济学的观点:人口的迁
缅甸伊洛瓦底三角洲地区是个华人华侨集聚之区。上世纪六十年代以前,该地区凡有华侨华人聚集的城市、县区、村庄,甚至有华人商店或华人住户超过十家的地方,都有华侨建立的私
通过台安县成功创建省级生态县和在此基础上进行国家级生态县创建实践的回顾,总结了创建实践的经验和存在的问题,提出了国家级生态县创建新的思考和建议,为平原地区生态县创
诉讼服务机制通过简化司法活动环节,倡导公开、高效、低成本的司法服务来满足群众的司法服务需求,保障群众在司法过程中的知情权和监督权。自开展以来得到普遍的欢迎和好评。
本论文主要研究“有+vp”这一汉语语言现象,运用语法化理论作为理论基础,对“有”的语法化过程进行理论性和系统性的释解。在现代汉语中,“有”一词的用法发生了变化,如在例句“
牛街回族聚居区作为北京市历史悠久、影响最广的回族聚居区,在新中国成立以后的计划经济、以及改革开放以来商品经济、城市扩张的驱力下完成了解构与重建的过程。社区是一个