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本文以绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.3711为出发菌株,利用其RNA反转录得到的eDNA为模板,PCR扩增Trichoderma viride的不含信号肽的外切葡聚糖酶基因(ebhⅡ)以及含信号肽的外切葡聚糖酶基因(cbhⅡ)和内切葡聚糖酶基因(egⅢ),回收的DNA片段分别与表达质粒pSE-380和pYES2连接,获得重组质粒pSE-cbhⅡ与pYES-cbhⅡ及pYES-egⅢ.将重组质粒pSE-cbhⅡ导入大肠杆菌BL21(DE3),pYES-cbhⅡ和pYES-egⅢ导入酿酒酵母INVScI中。诱导表达后,进行SDS-PAGE分析。结果表明大肠杆菌重组子有特征蛋白条带出现,酿酒酵母重组子中则未检测到目的条带。利用DNS糖化力法测定大肠杆菌和酿酒酵母重组子BL21/pSE.cbhⅡ,INVScI/pYES-cbhⅡ及INVScⅠ/pYES-egⅢ表达产物的酶活力,BL21/pSE-cbhⅡ和INVScI/pYES2-cbhⅡ的粗蛋白中未检测到外切葡聚糖酶的酶活力,INVScI/pYE-egⅢ中的内切葡聚糖酶活力为0.03 U/ml。最佳诱导时间为60h,对酿酒酵母表达系统表达的内切葡聚糖酶EGⅢ生物学特性研究显示,它的最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.8。