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猪带绦虫（Taenia solium）是一种重要的人兽共患寄生虫,其幼虫不仅可以寄生于人的脑、眼、肌肉等处,引起相应部位的囊尾蚴病,严重危害人类健康。cAMP依赖性蛋白激酶（PKA）是cAMP信号通路中关键的信号转导分子,PKA已成为治疗癌症、炎症、寄生虫病和其他免疫调控紊乱等复杂疾病的重要药物靶点。此外,该酶的调节亚基具有种特异性,具有作为猪囊虫病的特异性诊断抗原候选分子的潜力。鉴于此,本文对猪带绦虫cAMP依赖性蛋白激酶的调节亚基和催化亚基分别进行了研究,取得的结果如下:1、利用猪带绦虫基因组和转录组数据分别设计猪带绦虫PKA调节亚基基因（Tspka-r）和催化亚基基因（Tspka-c）特异性引物,以猪囊尾蚴总RNA为模板,通过RT-PCR扩增Tspka-r和Tspka-c基因的完整ORF,并通过生物信息学分析并鉴定。结果表明,TsPKA-r和TsPKA-c均具有PKA的特征性结构域。Tspka-r基因ORF大小为1 104 bp,编码367个氨基酸残基;Tspka-c基因ORF大小为1 032 bp,编码343个氨基酸残基。2、成功构建了重组表达质粒pET30a（+）-Tspka-r,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,获得以可溶性形式高效表达的重组蛋白TsPKA-r,大小约为55 kDa。Western blotting检测结果表明,TsPKA-r可以被猪囊尾蚴病阳性血清识别。以镍珠琼脂糖凝胶亲和层析法纯化的重组蛋白TsPKA-r为包被抗原,建立猪囊尾蚴病间接ELISA诊断方法。结果显示,基于TsPKA-r的间接ELISA方法检测猪囊尾蚴病的敏感性和特异性分别高达93.88%和96.40%,且与猪细颈囊尾蚴病、旋毛虫病、猪弓形虫病血清之间无交叉反应。表明TsPKA-r有望作为猪囊虫病诊断的候选抗原分子,从而解决现有血清学诊断方法存在交叉反应的难题。3、成功构建了重组表达质粒pPIC9k-Tspka-c,在毕赤酵母KM71中进行诱导表达,经Western blotting及质谱测序鉴定重组蛋白TsPKA-c成功表达,大小约为42 kDa。利用镍珠琼脂糖凝胶亲和层析法纯化的重组蛋白TsPKA-c免疫新西兰大白兔,经3次免疫后,获得了高滴度的特异性IgG抗体。免疫组化实验结果表明,TsPKA-c主要位于成虫的体壁及生殖器官,推测猪带绦虫TsPKA-c可能与虫体摄取营养及生殖发育有关。4、通过对酶动力学分析得出TsPKA-c对底物Cretide的Km值为36.3679±2.64μM;Vmax为0.7648±0.013 nMol/min/μg。抑制动力学分析发现,H89和PKI（14-22）对TsPKA-c具有明显的抑制作用,其IC50分别为14.55±1.5μM、23.09±0.5μM。由此预示,H89和PKI（14-22）可以抑制TsPKA-c的活性,从而有望成为治疗囊虫病的新型药物。5、以体外培养的豆状囊尾蚴为模型,用H89和PKI（14-22）分别处理虫体后,观察抑制剂对虫体活力及虫体葡萄糖吸收的影响。结果表明,H89和PKI（14-22）能明显抑制虫体活力,且抑制作用呈剂量-时间依赖关系,5μM H89 36小时内就可使虫体致死,而PKI（14-22）则需要25μM。葡萄糖含量检测显示处理组葡萄糖含量与对照组相比明显降低（P<0.05）,表明TsPKA-c在寄生虫糖代谢中发挥重要作用。进一步提示TsPKA-c具有作为囊虫病药靶的潜力。