周围性面瘫是耳鼻喉科的常见病，其发病的主要原因是各种情况引起的面神经损伤，通常导致面神经内压增高，运动神经元凋亡，神经的传导功能障碍，导致面瘫。面神经损伤将导致的面神经内压升高、运动神经元凋亡，caspase信号通路可能是神经元凋亡的最终执行者。本研究拟采用大鼠制作面神经高内压模型，分别研究面神经运动神经元在神经高内压、断伤和正常状态下凋亡情况；拟从蛋白质水平观察，caspase家族蛋白酶中的亚族成员，研究Caspase-3对面神经高内压状态，断伤状态和正常状态下面神经运动神经元凋亡的调控作用，研究可否减少运动神经元凋亡的数量、促进神经轴突再生及神经功能的恢复，完善面神经损伤修复理论，使得面神经损伤后的修复不仅局限于面神经周围部分，同时还应考虑对中枢部分的干预，探讨最佳修复时机和治疗方法，有可能为临床上面瘫的治疗开辟一条充满前景的新途径，具有重要研究意义。 第一部分Wistar大鼠面瘫模型的研制及冰冻切片制备目的探索和建立Wistar大鼠面瘫模型。取材冰冻切片制备。 方法:瞬目反射正常的Wistar大鼠60只(由复旦大学上海医学院实验动物部提供)，体重250～300g,雌雄兼用，分笼饲养，常规饮食。将大鼠麻醉后，行左侧耳廓后弧形切口，在手术显微镜下分离至面神经出茎乳孔处，用持针器压榨面神经30s30只，任意选取5只大鼠的右侧作为正常对照组。另30只在大鼠左侧同样位置切断面神经总干并切除8～10mm防止再生[1]o将压榨面神经30s(简称阻断组)和切断面神经总干组(简称切断组)大鼠分成6组，分别在术后1，3，7，14，21，28天对应组的实验大鼠取材。 大鼠麻醉后，取脑干脑桥部固定，脱水处理后包埋剂包埋，低温连续切片。 结果: 60只大鼠在术后均出现左侧(即实验侧)上睑下垂，左侧闭眼不全，胡须震颤消失，60只大鼠出现不同程度的左侧眼分泌物增多，12只出现左侧泪溢及不同程度的红眼。取脑干脑桥部固定，脱水处理后包埋剂包埋，低温连续切片。制成20微米厚冰冻切片低温保存。 结论:已经成功建立Wistar大鼠面瘫模型，掌握制备Wistar大鼠面瘫模型的适宜条件及方法，且术后面瘫成功率达100％。 第二部分免疫组化法检测caspase-3的表达。 目的：研究面神经压榨及断伤后面神经运动神经元细胞凋亡相关蛋白caspase-3的表达。 方法：应用链霉素卵白素生物素复合物(strept-avidin-biotin-enzyme,SABC)检测术后第一天至四周面神经运动神经元细胞凋亡相关蛋白caspase-3(cysteineaspartase-3)的表达。 结果：面神经切断组，面神经运动神经元caspase-3的表达呈上升又下降的过程，其中切断后第七天为最高峰，1～7天caspase-3的阳性率((-x)±s)为(25±1.2)％～(62±4.6)％，7～28天caspase-3的阳性率为(62±4.6)％～(0±0.0)％；面神经阻断组，面神经运动神经元caspase-3的表达与面神经切断组相似，1～7天caspase-3的阳性率((-x)±s)为(23±1.2)％～(58±7.9)％，7～28天caspase-3的阳性率为(58±7.9)％～(0±0.0)％。 结论：不同程度面神经损伤后面神经运动神经元caspase-3呈暂时性高表达，随面神经功能的恢复而表达逐渐减少。