2型猪链球菌（Streptococcus suis serotype 2，S. Suis 2）是一种重要的人兽共患病病原。它不仅可感染猪致急性败血症、脑膜炎、关节炎、心内膜炎及急性死亡，而且可通过伤口等传播途径感染人使人患脑膜炎、败血病等疾病，对养猪业及相关从业人员均造成严重威胁。早期研究表明，与S. Suis 2致病性相关的毒力因子主要有荚膜多糖(Capsular polysaccharide，CPS）、溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein，MRP)、胞外因子(Extracellular factor，EF）、溶血素(Suilysin，SLY)等。但通过构建突变株及转座子插入等技术证实，荚膜多糖是目前唯一公认的毒力因子。目前，S. Suis 2致病的具体机制仍不清楚。近年来国外研究表明，猪链球菌血清浑浊因子(Opacity factor of S. Suis，OFS)是猪链球菌中的一种重要的毒力因子。序列比对结果显示：中国强毒株05ZYH33中也存在OFS编码基因，本研究以05ZYH33的基因组为模板，利用 PCR 技术扩增了ofs37-683序列，构建 pGEX4T-2:: ofs37-683原核表达质粒，转化入 E. Coli BL21（DE3），初步得到了OFS37-683重组蛋白的表达产物。为进一步研究 ofs在猪链球菌感染中的作用，本研究通过同源重组的方法，成功构建了ofs 及ofs N-末端片段的基因敲除突变株。PCR和Southern杂交显示 ofs基因敲除突变株构建成功。PCR和RT-PCR显示 ofs N-末端片段的基因敲除突变株构建成功；体外生物学性状分析结果表明，与野毒株相比，基因敲除株的溶血活性、生长曲线等基本生物学性状并没有很大的变化；小鼠致病性试验结果显示：与野毒株相比，基因敲除株的毒力降低。为进一步研究 ofs的致病机制奠定了基础。