多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同白血病细胞中的表达及不同分化诱导剂的影响

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目的:从mRNA水平检测NB4细胞株、K562细胞株、SHI-1细胞株中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(ppGalNAcTs)的表达情况及研究用中药多糖和分化诱导剂维生素D3培养K562细胞株后ppGalNAcTs的表达变化,以初步了解该酶在白血病发生、发展中的相关性作用及中药多糖和分化诱导剂维生素D3对其的影响。 方法:1.采用RT-PCR法检测:(1) 多肽:N—乙酰氨基半乳糖转移酶家族在NB4细胞株、K562细胞株、SHI-1细胞株中的mRNA表达;(2) 中药多糖和分化诱导剂处理后K562细胞株ppGalNAcTs的mRNA表达差异。2.MTT法检测加中药多糖和分化诱导剂处理后K562细胞株的存活率。3.流式细胞仪检测加中药多糖和分化诱导剂处理后K562细胞株的凋亡情况。 结果:1.K562细胞株中ppGalNAcT2、T4、T5、T7,NB4细胞株中ppGalNAcT1、T2、T3、T4、T7和SHI-1细胞株中T2、T9、T10有不同程度表达。 2.加入中药多糖和VD3培养后,K562细胞株中ppGalNAcT2、T4、T5、T7表达量增加。流式细胞仪检测结果显示细胞G1期阻滞,MTT结果显示无细胞死亡。 结论:本实验中ppGalNAc-Ts在不同细胞中表达情况不一致,推测不同的多肤:N一乙酸氨基半乳精转移醉家族在不同白血病细胞中的表达及不同分化诱导剂的影响中文摘井ppGaiNAc一Ts其多肤底物特异性不同,T2在每种细胞中都有表达,提示其有可能是O糖链合成的关键酶。加药后pp GaINAc一Ts的表达量有所增加,说明细胞的识别和粘附功能增强,恶性程度降低;细胞Gl期阻滞而MTT结果显示无细胞死亡推测细胞生长抑制不是由于细胞凋亡而是由于细胞增长减慢所致,有可能预示着分化过程的开始。
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