RNA干扰HIF-1α对宫颈癌细胞基质金属蛋白酶-2表达影响的研究

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目的缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha, HIF1-α)是普遍存在于实体瘤组织中的缺氧应答调控因子,在维持细胞能量代谢、肿瘤血管生成、肿瘤细胞转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。本研究探讨RNA干扰HIF-1α对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在子宫颈癌HeLa细胞中表达的影响,初步探讨其机理。方法1将15只裸鼠随机分为三组,空白对照组用HeLa细胞接种,阴性对照组用pGenesil-1-HeLa细胞接种,实验组用HIF-1α-HeLa细胞接种;2用免疫组织化学法检测各组移植瘤组织中HIF-1α,上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin),钙紧张素(β-catenin)和MMP-2的表达;3将HeLa细胞,转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞(pGenesil-1-HeLa细胞)、转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞(HIF-1α-HeLa细胞)分别在乏氧条件下(1 % O2)及常氧(21 % O2)条件下培养48 h,用western blot法检测各组细胞中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin和MMP-2的表达。结果1免疫组化法分析各组移植瘤组织中HIF-1α,E-cadherin,β-catenin和MMP-2的表达,空白对照组分别为(69.0±12.1) %,(17.0±3.6) %,(56.0±7.9) %,(60.0±5.0) %;阴性对照组分别为(62.8±12.3) %,(19.0±5.9) %,(53.0±6.9) %,(58.0±7.4) %;实验组分别为(17.4±8.8) %,(51.0±9.9 %,(24.0±2.6) %,(23.0±4.6) %;2三种细胞中HIF-1α与MMP-2的表达存在正相关性,相关系数r =0.521 (P =0.035);3 western blot分析,HeLa细胞和pGenesil-1-HeLa细胞乏氧48 h时HIF-1α,β-catenin,MMP-2蛋白高表达,而E-cadherin蛋白低表达,HIF-1α-HeLa细胞在乏氧和常氧48 h时β-catenin和MMP-2蛋白低表达,而E-cadherin蛋白高表达,HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞和HIF-1α-HeLa细胞在常氧48 h时及HIF-1α-HeLa细胞在乏氧48 h时HIF-1α蛋白低表达。结论在人宫颈癌HeLa细胞中干扰HIF-1α后MMP-2的表达下降,两者存在正相关性,可能与E-cd/cat复合物有关。
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