总状共头霉SPSR的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :天津师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:loveni978
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物寄生线虫是植物病害的重要病原物之一,其寄生范围广,对全世界农作物生产构成了严重威胁。第一代线虫生防因子为活菌制剂,受环境影响较大;第二代线虫生防因子制剂多为脂溶性,水中溶解度差,实际应用困难。本实验室筛选出的丝状真菌Syncephalastrum racemosum,其发酵液具有很强的杀线虫活性,且为酸性、耐热,这与Syncephalastrum racemosum产的天冬氨酸蛋白酶syncephapepsin的酸性蛋白属性相一致,因此有必要研究该酶是否在Syncephalastrum racemosum代谢产物杀线虫过程中发挥作用。 本论文通过RT-PCR方法克隆了总状共头霉的天冬氨酸类蛋白酶基因,并选择了四种pET载体,在大肠杆菌中进行了原核表达,主要研究结果如下:1.以总状共头霉(Syncephalastrum racemosum)菌株总RNA为模板,通过RT-PCR方法,获得了去除自身信号肽的天冬氨酸类蛋白酶syncephapepsin基因。2.构建了克隆载体pUC18-SPSR,并对SPSR基因进行了序列测定。经过分析,得到了该基因片段的序列,大小为656bp。通过BLAST比对,与天冬氨酸蛋白酶syncephapepsin基因同源性达到90%。3.选择了pET载体系统中的四种载体:pET-22b(+)、pET-28a(+)、pET-30a(+)、pET-40b(+),分别构建了表达载体。经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳进行鉴定,该蛋白大小约为38KDa,并已成功表达。结论为:构建了pUC18-SPSR克隆载体和四种pET载体,使用大肠杆菌表达系统可成功表达syncephapepsin,为今后的真核表达奠定基础。
其他文献
研究了甘蓝、番茄不同间作比例对甘蓝生长及主要害虫种群数量的影响,以期找到适宜的间作比例,为生产实践中进一步推广应用提供理论依据.试验结果表明,甘蓝与番茄间作模式,对
甲醛传感器如今已经大量而广泛的应用于社会的各个领域当中,如工业、气体检测、人们的家居生活等。在甲醛传感器的制备与研究当中,人们已经不仅是把重点放在传感器的传统特性的
当芯片特征尺寸进入深亚微米后,一些特定的小尺寸制造工艺会往器件沟道区引入应力,这会对器件性能产生影响。因此,在小尺寸下如何有效调制器件沟道区应力将显得尤为重要。通过对器件沟道区应力的调制使得器件性能可以更为灵活的被调控,从而以满足特定的需求。本文结合目前主要的槽形应力调制技术,将其应用在两种不同类型的器件,研究其对器件力学特性及电学特性的影响。首先,针对小尺寸器件下为降低源漏接触电阻而采用NiSi
学位
近年来,由于成像技术的不断进步,数字图像包含的数据量与日俱增。在处理大规模图像时,串行算法由于处理速度较慢,难以满足实时性的要求。GPU(Graphic Process Unit)具有计算
草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是我国著名的“四大家鱼”之一。由于自然和人为因素的影响,致使长江水系“四大家鱼”资源日趋衰退(李思发,2001)。针对草鱼出现的种质退化现状
本文通过对荣华二采区10
期刊
中国古代教育家孔子成说:“不愤不启,不悱不发”;孟子的“君子引而不发,跃如也”;以及《学记》中所指的“道而弗抑,开而弗达”等教育思想,都包含了鲜明的情感特征。其中“愤”(心求
重金属污染已经成为一个日趋严重的环境问题。重金属可以通过食物链富集进入人体,对人类健康造成极大危害。在重金属的富集过程中,植物作为初级生产者起着重要的作用。因此,植物
本论文分为2个部分,第一部分是蛋白质结构域的鉴定,第二部分是关于GDF3的初步功能分析以及外源重组表达的研究。 在第一部分中,通过生物信息学的方法鉴定了两个新的结构域。N
本刊讯云南省农科院花卉研究所吴学尉、张艺萍、吴丽芳等人运用常规杂交结合胚培养技术、历时10年培育的东方百合品种‘白雪公主’,近日获得植物新品种权证书。‘白雪公主’