【摘 要】
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肠道健康对鱼类生长非常关键。本试验研究了异亮氨酸对杂交江鲿（Pelteobagrus vachelli×Leiocassis longirostris）生长性能和肠道健康的影响。选择33.0±0.1g的杂交江鲿630尾,随机分成7个处理,每个处理包含3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂异亮氨酸水平为5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5和20.0g/kg的半纯合日粮8周。考察异亮氨
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肠道健康对鱼类生长非常关键。本试验研究了异亮氨酸对杂交江鲿（Pelteobagrus vachelli×Leiocassis longirostris）生长性能和肠道健康的影响。选择33.0±0.1g的杂交江鲿630尾,随机分成7个处理,每个处理包含3个重复,每个重复30尾鱼,分别投喂异亮氨酸水平为5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5和20.0g/kg的半纯合日粮8周。考察异亮氨酸对杂交江鲿生产性能和肠道健康的影响,探究异亮氨酸保护鱼类肠道健康的作用机制。主要研究内容如下:1.异亮氨酸对杂交江鲿生长性能的影响结果显示,日粮添加适宜水平异亮氨酸:（1）增重率（PWG）、摄饵量（FI）、特异性生长率（SGR）、饲料转化效率（FE）、蛋白质转化效率（PER）显著提高（P＜0.05）;（2）全鱼粗蛋白含量、粗脂肪含量、蛋白质沉积率（PPV）、脂肪沉积率（LPV）和灰分沉积率（APV）显著提高（P＜0.05）,对全鱼粗水分和粗灰分含量无显著影响（P＞0.05）;以PWG为标识,二次回归分析确定杂交江鲿异亮氨酸需要量为12.43g/kg饲粮（32.05g/kg饲粮蛋白）。2.异亮氨酸对杂交江鲿肠道健康的影响结果显示,日粮添加适宜水平异亮氨酸:（1）肠长指数（RGL）显著提高（P＜0.05）,而对肠重（IW）和肠体指数（ISI）无显著影响（P＞0.05）;（2）肠皱襞高度（IFH）、肠皱襞宽度（IFD）、肠皱襞纵截面积（IFSA）、肠道肌层厚度（IMT）、肠皱襞杯状细胞数量（GCS）均显著升高（P＜0.05）;（3）粘蛋白2（MUC2）、紧密连接蛋白ZO2、claudin3和claudin7 mRNA水平显著上调（P＜0.05）,紧密连接蛋白ZO1、Occludin、claudin2和肌球蛋白轻链激酶（MLCK）mRNA水平显著下调（P＜0.05）;（4）肠道活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和蛋白质羰基（PC）含量显著下降（P＜0.05）,总超氧化物歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽硫转移酶（GST）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）和谷胱甘肽还原酶（GR）活力,抗超氧阴离子（ASA）能力、抗羟自由基（AHR）能力和谷胱甘肽（GSH）含量显著提高（P＜0.05）;（5）肠道GST、GPx1a和核因子相关因子2（Nrf2）mRNA水平显著上调（P＜0.05）,Cu Zn SOD、CAT、谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基（GCLC）和Kelch样ECH联合蛋白1（Keap1）mRNA水平显著下调（P＜0.05）;（6）肠道丝氨酸/苏氨酸激酶1（Akt1）、Akt2、Akt3、氨基酸末端激酶1（JNK1）、JNK2、JNK3和叉头框蛋白6（FOXO6）mRNA水平显著提高（P＜0.05）,FOXO1、FOXO3a和FOXO4 mRNA水平显著下降（P＜0.05）;（7）下调半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase3）和caspase9 mRNA水平（P＜0.05）;（8）肠道溶菌酶（LZM）、酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（AKP）活性,补体3（C3）、C4和免疫球蛋白M（Ig M）含量显著提高（P＜0.05）;（9）肠道C型凝集素（c-type-lectin）、c-LZM、g-LZM和铁调素（hepcidin）mRNA水平显著提高（P＜0.05）;（10）显著上调肠道去乙酰化酶1（sirt1）、核糖体S6蛋白激酶（p90rsk）和β防御素（β-defensin）mRNA水平（P＜0.05）,胞外信号调节激1（ERK1）和ERK2 mRNA水平显著降低（P＜0.05）。综上所述:适宜量的异亮氨酸能提高杂交江鲿生长性能、促进肠道发育。异亮氨酸可能通过调控Nrf2/Keap1、Akt/FOXO3a和JNK/FOXO4信号分子基因转录,调节抗氧化酶相关基因的表达,提高肠道抗氧化酶活性和抗氧化物含量,减少蛋白质和脂质的氧化损伤,提高肠道抗氧化状态;抑制肠细胞凋亡,进而保证肠细胞完整性。此外,异亮氨酸能促进MUC2基因表达;通过MLCK调控鱼类肠道紧密连接蛋白基因的表达,提高肠道紧密连接性。异亮氨酸能通过提高LZM、ACP、AKP活力和C3、C4与Ig M含量以及β-defensin、c-type-lectin、c-LZM、g-LZM和hepcidin mRNA水平增强肠道化学屏障功能。进一步研究发现,β-defensin、c-type-lectin和c-LZM mRNA转录水平的升高可能与sirt1/ERK1/2/p90rsk信号分子基因转录有关。
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