肿瘤相关巨噬细胞在口腔黏膜下纤维性变癌变中的定量研究

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目的研究巨噬细胞在口腔正常及口腔黏膜下纤维性变组织中的表达情况,并探讨肿瘤相关巨噬细胞在口腔黏膜下纤维性变癌变中的可能作用。方法收集临床和病理确诊的口腔鳞癌(和)或口腔黏膜下纤维性变组织标本以及口腔正常黏膜组织,其中OSF癌变组30例,非OSF癌变口腔鳞癌组20例,OSF组20例,正常组织15例。应用CD68单克隆抗体标记巨噬细胞,采用免疫组化SP三步法检测其表达,光学显微镜拍照后采用Image-Pro Plus6.0进行图像分析和数据测量。拍照时先于低倍镜下选取5个阳性细胞密集的“热点”区域,转换到高倍镜拍照并利用Image-Pro Plus6.0软件计算细胞数量和积分光密度值。采用SPSS11.0for windows软件包对数据进行统计学处理,根据方差检验的情况,不同组间分别采用单因素方差分析和Kruskal-WallisH检验,组间相互比较采用Nemenyi检验和SNK检验;OSF癌变组及非OSF癌变口腔鳞癌组各项临床病理参数与肿瘤相关巨噬细胞的分析采用Mann-Whitney U检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果1.CD68阳性分子表现为浅黄、棕色及褐色的颗粒,定位于细胞质或者细胞膜,CD68阳性的巨噬细胞表现为带有黄褐色或棕褐色颗粒的、具有不规则形状的大细胞,在正常组织及OSF组织中主要位于黏膜下层以及皮下组织中,肿瘤组织中主要位于“癌巢”及癌旁的间质内。2.不同组织中CD68阳性巨噬细胞数分别为OSF癌变组(91.99±9.63)>非OSF癌变口腔鳞癌组(72.26±8.74)>OSF组(22.68±6.19)>正常组(6.81±5.73),积分光密度值分别为OSF癌变组(916.28±18.77)>非OSF癌变口腔鳞癌(698.9±17.07)>OSF组(127.01±8.94)>正常组(89.94±7.46),不同组间细胞数及积分光密度值差异有显著性(P<0.05)。3.OSF癌变组及非OSF癌变口腔鳞癌组中不同年龄组、肿瘤大小及不同病理分级间肿瘤相关巨噬细胞数和积分光密度值的差异均无显著性(P>0.05),淋巴结无转移组和有转移组间,临床Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期肿瘤之间相关巨噬细胞数和积分光密度值差异具有显著性(P<0.05)。结论1.CD68阳性巨噬细胞在口腔正常及病变组织中广泛存在,在正常组织及OSF组织中主要位于黏膜下层以及皮下组织中,非OSF癌变口腔鳞癌及OSF癌变组织中主要位于“癌巢”及癌旁的间质内。2.肿瘤相关巨噬细胞在正常组织、口腔黏膜下纤维性变组织、非OSF癌变口腔鳞癌组织及OSF癌变组织中表达存在差异,提示肿瘤相关巨噬细胞可能在OSF的癌变过程有重要作用。3.肿瘤相关巨噬细胞在非OSF癌变口腔鳞癌及OSF癌变组织有无淋巴结转移、不同临床分期中表达存在差异,提示肿瘤相关巨噬细胞可能与肿瘤淋巴结转移有关。
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