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Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1),是1994年Sudol首次发现的一种细胞内连接蛋白和转录辅激活因子,但YAP1最初是在果蝇中发现的,又名Yri;YAP1基因位于鸡的1号染色体上,含7个外显子,它所编码的YAP1蛋白质分子由448个氨基酸构成,是一个富含脯氨酸65 kDa的磷蛋白,又称YAP65因子。YAP1具有促进细胞分裂和增殖的功能,是生物体中重要的细胞生长因子。最近的研究显示YAP1在人类卵巢中具有高表达水平,并且其过度增殖导致卵巢癌。由于YAP1基因与许多癌症有很大的相关性,因此它也被称为原癌基因。其中之一是Hippo/MST信号通路在网络调节中的参与,在细胞增殖中起着重要的调节作用。在本研究中以150日龄海兰褐蛋鸡、庄河大骨鸡为试验对象,利用相对定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测YAP1基因在鸡卵泡生长中mRNA的时空表达模式以及蛋白的测定,大骨鸡YAP1基因采用PCR-SSCP技术筛选相关SNP。预计可能与育种表型有关的分子标记可用于选择分子育种,本文研究的主要实验结果如下:实验一,相对定量RT-PCR实验结果显示:鸡YAP1基因在150日龄海兰褐蛋鸡卵巢基质,分化前的卵泡和不同分化的卵泡中表达,但各级卵泡间表达水平差异不显著(P>0.05)。此结果表明,YAP1基因无论在前等级卵泡还是在不同等级化卵泡的mRNA相对表达丰度保持于一个稳定的水平,呈现出组成型表达的特点。此结果初步表明,在不同生长发育时期鸡的卵泡组织中,一个相对平稳的YAP1基因mRNA表达水平可能是维持各级卵泡正常生长发育所必需的。此结果表明,YAP1基因是调控鸡卵巢组织中各级卵泡正常生长发育的重要因子之一。实验二,免疫组化实验结果显示:鸡YAP1蛋白分子主要表达于卵巢间质组织,分化前的卵泡卵母细胞和颗粒细胞,但在膜细胞中未检测到表达信号。在前等级卵泡发育早期,卵母细胞和间质细胞中检测到棕色阳性信号。随着前等级卵泡的不断发育,卵母细胞不断增大,膜层细胞和颗粒细胞随之逐渐分裂增殖,膜层和颗粒细胞层逐渐变厚,在卵母细胞和颗粒细胞中检测到强阳性信号,但在膜细胞中未检测到阳性信号。此表明,YAP1蛋白质分子主要在卵母细胞和颗粒细胞表达,在膜层细胞中不表达或可能微弱表达(但以免疫组化方法检测不到阳性信号)。这一结果表明,在生长和发育阶段卵泡中,YAP1分子可能主要以自分泌或旁分泌方式发挥局部调节作用。实验结果为进一步研究YAP1分子在不同卵泡生长发育阶段的特异性调控和分子机制提供参考。实验三,PCR-SSCP与产蛋性状关联分析结果表明:在YAP1基因的第2外显子上检测到G2964A碱基突变。根据SNP位点,将360只大骨鸡分为三种基因型:AA,AG和GG。等位基因G的频率高于等位基因A,AG基因型频率高于AA、GG基因型。对于产蛋性状其中AA型母鸡在30,43,57,66周龄产蛋量上显著高于AG、GG型(P<0.05),而AG型在30,43周龄产蛋量上与GG型差异不显著(P>0.05),AG型在57,66周龄产蛋量上显著高于GG型(P<0.05),这四个产蛋性状在SNP位点上的加性遗传方差的比例也相对较高。此结果可为挖掘新的潜在分子标记用于以提高鸡产蛋性能为主要育种目标的标记辅助育种选择提供分子依据。