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在我国，前列腺癌占所有男性泌尿生殖系统恶性肿瘤的第3位[1]。前列腺癌发病隐袭，早期无典型症状，当被人们发现时大多已是晚期。这使前列腺癌的早期预防和诊断显得尤为困难。前列腺癌的早期诊断主要是根据血清中PSA的含量，此外直肠指诊也是一个主要的辅助手段[2,3]。前列腺癌的临床治疗方法分为保守治疗和主动性治疗。主动性治疗包括前列腺癌根治术、放射治疗、试验性前列腺癌局部治疗和内分泌治疗。由于目前的临床治疗方法对中晚期前列腺癌的治疗仍不是十分有效，因此，近年来针对前列腺癌的基因治疗受到了大家更多的关注，基因治疗将为其提供新的突破[4]。人程序性细胞死亡因子4（PDCD4）是新近发现一个抑癌基因，在肝细胞癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤[5-7]中均检测到PDCD4的mRNA及蛋白表达的减少甚至缺失，而且它与肿瘤病理分期及预后密切相关。以PDCD4为药靶的基因治疗方法有望在一定程度上实现对前列腺癌的有效控制。目的：1、观察程序性细胞死亡因子PDCD4在正常前列腺组织和不同分级前列腺癌组中的表达模式及分布情况,明确其是否能够为分析前列腺癌患者病情进展提供依据。2、构建并包装过表达PDCD4分子的慢病毒表达系统，利用该系统建立高表达PDCD4的前列腺癌细胞亚系，观察其对前列腺癌细胞增殖能力的影响，进而分析其对治疗性药物的药物敏感调节作用。3、探讨PDCD4自身表达的转录后调控机制,明确其可能的上游调控分子miR-155对其具有的负相调节作用。方法：1、对临床手术收集到前列腺癌标本进行免疫组化染色，其中癌组织标本为42例，癌旁增生组织标本为12例。肿瘤的病理分级标准为：WHO分级结合Gleason评分系统。分级结果为：高分化癌（1-4分）9例，中分化癌（5-7分）14例，低分化癌（8-10分）19例，并进行分析。2、利用PCR扩增PDCD4编码区片段，克隆入pENTRA-3C入门载体，利用LR clonase Ⅱ重组酶将目的基因片段转接入pLenti-6.3慢病毒表达载体并包装相应的慢病毒，以表达红色荧光蛋白mCherry的pLenti-6.3-mCherry慢病毒载体包装的慢病毒为对照，感染人前列腺癌DU145细胞，通过Blasticidin抗生素筛选出能够稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株。利用Westernblot法检测PDCD4蛋白的表达量，MTT法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化。利用TRAIL检测高表达PDCD4的前列腺癌细胞对化疗药物的药物敏感情况。3、利用第二部分实验中PCR扩增的启动子片段先克隆入T载体进行测序，待测序正确后再克隆入报告基因载体。选用野生型海参荧光素酶报告基因载体pRL为内参照与脂质体2000载体组合共同转染哺乳动物，48小时候后收集样品并进行荧光分析。利用miR-155的inhibitor和mimics转染DU145细胞,观察其对前列腺癌细胞自身的影响以及前列腺癌细胞对TRAIL的药物敏感情况。结果：1、免疫组化结果。42例前列腺癌组织中阳性表达率仅为30.95%（13/42），而癌旁增生组织中表达率为75.00%(8/12)，前列腺癌组织中的PDCD4表达率明显低于增生组织，对42例人前列腺癌组织中PDCD4的表达情况进行统计学分析结果显示：PDCD4的表达与病理类型及组织学分级相关(P<0.05)，与临床TNM分期及Gleason评分密切相关(P <0.05)。2、构建了重组慢病毒载体pLenti6.3-PDCD4。利用重组慢病毒表达系统筛选稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株，并用Western blot法进行了验证。MTT法及平板克隆形成实验结果显示PDCD4高表达的DU145细胞亚株的增殖能力受到抑制，并提高了前列腺癌细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性。3、发现PDCD4的上游有一个负向调控子—miR-155。抑制miR-155诱导了DU145细胞的自发凋亡并提高了DU145细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性。结论：前列腺癌组织中PDCD4的表达明显低于增生组织，并随着恶性程度的增加其表达量逐渐减少，可以看出PDCD4随着肿瘤恶性程度的增高而呈现出低表达的趋势，这个结果提示PDCD4在肿瘤的发展过程中有一定的作用，对于指导临床治疗方面有重要参考价值。我们成功构建了表达PDCD4分子的慢病毒表达载体，筛选出稳定表达PDCD4的DU145细胞株，发现过表达的PDCD4分子可以显著抑制DU145前列腺癌细胞的增殖。我们还发现了PDCD4上游的一个负向调控子—miR-155；抑制miR-155之后能诱导出DU145的自发凋亡和提高其对TRAIL诱导凋亡的敏感性，为进一步探明前列腺癌中miR-155-PDCD4假想轴的存在打下了坚实的基础。